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辐射诱导人细胞系CEM、外周血单个核细胞DNA修复基因hHR21sp的表达研究
目的研究辐射对人T淋巴细胞白血病细胞系(CEM)、外周血单个核细胞的hHR21sp基因转录表达水平的影响及意义.方法分别对人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后不同时间提取细胞总RNA,通过RT-PCR与hHR21sp基因特异引物杂交,以β-actin为内参照放射影像密度扫描检测人T淋巴细胞白血病细胞系CEM、单核细胞DNA修复基因表达.结果在UV-辐射、γ-辐射后早期(3～6 h),人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和淋巴细胞hHR21sp基因的表达水平明显增加,照射后6 h hHR21sp基因的表达水平增加多且UV辐射更明显,在晚期(9 h)降低.比较人细胞系CEM和淋巴细胞两者hHR21sp基因的表达水平,γ辐射(3 Gy)后淋巴细胞对hHR21sp基因表达高于人细胞系CEM,且表达增加时间较长,达9 h;而人细胞系CEM受到γ辐射后早期表达增加,在6～9 h后表达降低.结论人T淋巴细胞白血病细胞系(CEM)和人淋巴细胞的DNA修复基因hHR21sp基因在一定剂量辐射(UV、γ辐射)范围内其表达水平随辐射剂量增加而诱导表达水平增高,且对UV辐射更敏感;提示hHR21sp基因在人细胞系CEM细胞和人单核细胞在照射损伤后表达增加,可能是促进单核细胞损伤修复的原因之一.
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FA贫血病人造血细胞hHR21sp基因表达的研究
目的检测UV和γ辐射对正常人外周血单核细胞的hHR21sp基因转录表达水平及hHR21sp在范可尼贫血（Fanconis Anemia FA）骨髓造血细胞和激活后的外周血单核细胞的转录表达情况,并分析hHR21sp基因在FA贫血发病机制中的作用。方法对范可尼贫血骨髓造血细胞和激活后的外周血单核细胞和正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后不同时间提取细胞总RNA，通过RT-PCR、Southern杂交、以β-actin为内参照放射影像对hHR21sp基因的转录表达水平进行检测,比较FA骨髓造血细胞与对照组差异和激活前后FA外周血单核细胞hHR21sp基因的表达水平。结果正常人外周血单核细胞与对照组比较在80j/m2 UV辐射hHR21sp表达于3h开始增加；在6h表达水平高，与正常对照有2倍差异（P<0.05）；而γ-辐射5 Gy辐射6 h增加明显，在9h后有所降低与正常对照有2倍多差异（P<0.01）。可见FA病人骨髓造血细胞和对照组的hHR21sp基因表达水平有明显差异（P<0.05）。实验发现在激活后对FA病人外周血单核细胞检测，hHR21sp基因表达较对照组PB-MNC降低达2倍之多（P<0.05）。结论 hHR21sp表达水平在一定剂量电离辐射范围内随辐射剂量增加而增高，且对γ-辐射较UV辐射敏感，FA病人骨髓造血细胞和对照组的hHR21sp基因表达有明显差异，激活后的FA病人外周血单核细胞 hHR21sp基因表达降低显著，提示FA病人造血细胞hHR21sp基因表达缺陷，本研究结果为下一步深入研究FA发病机制提供实验基础。
