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125I粒子照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的实验研究
目的 探讨125I粒子持续低剂量率照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的作用机制.方法 用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分析125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞的凋亡诱导作用,检测天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶Caspase-3活性来观察其对PC3细胞的凋亡诱导途径,并通过间接免疫荧光技术检测其对Bcl-2表达的影响.结果 DNA琼脂糖凝胶电泳可观察到清晰的"DNA梯度",流式细胞仪检测125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞具有明显的凋亡诱导作用.Caspase-3活性检测表明,Caspase-3活性无明显变化.流式细胞仪分析表明Bcl-2的表达随125I粒子剂量的增加而下降.结论 125I粒子持续低剂量率照射可诱导PC3细胞凋亡,其诱导凋亡与Bcl-2表达有关,与Caspase-3活性无关.
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3'取代吲哚类衍生物诱导HL-60细胞凋亡的实验研究
目的:研究3-吲哚乙基(3'-甲基-2'-酮)戊酰胺诱导HL-60细胞凋亡的作用机制.方法:用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分析3-吲哚乙基(3'-甲基-2'-酮)戊酰胺对HL-60细胞的凋亡诱导作用,检测天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8和Caspase-3活性来研究其对HL-60细胞的凋亡诱导途径,并通过间接免疫荧光技术检测其对Bcl-2表达的影响.结果:1.8%DNA琼脂糖凝胶电泳可观察到清晰的"DNA ladder",流式细胞仪检测3-吲哚乙基(3'-甲基-2'-酮)戊酰胺对HL-60细胞具有明显的凋亡诱导作用.Caspase活性检测表明,Csapase-3活性明显升高而Caspase-8活性无明显变化.流式细胞仪分析表明Bcl-2的表达随着受试物浓度的升高而下降.结论:3-吲哚乙基(3'-甲基-2'-酮)戊酰胺可诱导HL-60细胞凋亡,其诱导凋亡与Bcl-2表达及Caspase-3活性有关.
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赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用
目的:观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用及对细胞周期的影响.方法:MTT法观察药物对细胞增殖的抑制作用,碘化丙锭染色分析细胞周期变化,电镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化,多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率,并测定caspase-3的活性变化及caspase抑制剂对细胞存活率的影响.结果:赛特铂可抑制A2780细胞的增殖并诱导凋亡,具有明显的剂量依赖性,作用与顺铂相当.赛特铂主要导致A2780细胞S期细胞明显增加,G2/M期细胞少许增加.经赛特铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变.caspase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加,caspase抑制剂不完全抑制细胞死亡.结论:赛特铂影响A2780细胞周期分布,可体外诱导A2780细胞凋亡.caspase依赖性和caspase非依赖性途径参与了其凋亡过程,其中caspase依赖性途径又包括caspase-3依赖性和非caspase-3依赖性途径.
关键词： 卵巢肿瘤 赛特铂 顺铂 凋亡 天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶
