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沉默Rev1基因对人结肠癌细胞放射敏感性的影响
目的 探讨沉默Rev1基因对人高分化结肠癌细胞THC8307 X射线照射后增殖、凋亡的影响.方法 利用RNA干扰技术将Rev1基因的特异性片段转染THC8307细胞,用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后细胞中目的基因的表达;实验分空白对照组、阴性对照组、Rev1 siRNA组.分别给予0、6 GyX射线照射,运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同时段(0、24、48、72、96 h)细胞增殖情况,并绘制增殖曲线;流式细胞仪(FCM)检测不同剂量X射线处理后的细胞凋亡;Western blot检测各组PCNA、γ-H2AX、P53、Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,6 GyX射线照射后,沉默Rev1基因组细胞增殖速率明显降低(t=7.53,P<0.05),凋亡明显增加(t =6.23,P<0.05),增殖细胞抗原(PCNA)表达下降(t=4.39,P<0.05),γ-H2AX表达升高(t=5.48,P<0.05),P53表达升高(t=5.09,P<0.05)、Bax表达升高(t=3.32,P<0.05)、Bcl-2表达降低(t =6.13,P<0.05).结论 沉默Rev1基因,抑制了X射线作用下的结肠癌细胞THC8307的增殖,促进了凋亡,增加了其对X射线的放射敏感性.