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聚乙烯亚胺-胆固醇文献资料
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聚乙烯亚胺-胆固醇结合脂质微泡介导的基因转染系统
本文研究了聚乙烯亚胺-胆固醇阳离子聚合物(PEI-Chol)基因载体的性能及其结合中性脂质、聚乙二醇修饰脂质微泡介导的基因传递系统(微泡/PEI-Chol/DNA)的体外细胞基因转染效率.采用胆固醇甲酰氯与聚乙烯亚胺(M_w 1 800)通过酰胺化制得PEI-Chol,并运用瓜、~1H NMR和MADI-TOF-MS(基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱)对其结构和分子量进行测定,平均相对分子质量约为2 000.采用反相挥发法制备DPPC、DSPE-PEG_(2000)和全氟丙烷构建的粒径为2～8 μm的脂质微泡,并运用自组装技术将PEI-Chol/DNA复合物与微泡融合,构建微泡/PEI-Chol/DNA(bubble/PEI-Chol/DNA)基因转染系统;以pEGFP-CI(enhanced green fluorescent protein,增强型绿色荧光蛋白)为报告基因,用凝胶滞留试验考察PEI-Chol的DNA压缩能力,同时在A549和MCF-7两种细胞中比较以PEI-Chol为核心构建的各种载体系统的细胞毒性、抗血清沉淀作用以及细胞转染效率.结果发现,当N/P比值为4以上时,PEI-Chol能有效压缩DNA;PEI-Chol和构建的微泡系统对A549和MCF-7两种细胞几乎没有毒性;本微泡介导基因转染系统,一方面降低PEI-Chol的毒性,提高抗血清蛋白沉淀作用,另一方面提高其基因转染效果.研究表明新型bubble/PEI-Chol/DNA是一种高效低毒的非病毒基因载体系统.
