首页 > 文献资料
-
内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢调控HepG2细胞凋亡
探讨内源性胱硫脒-y-裂解酶/硫化氢(CSE/H2S)对人肝癌HepG2细胞凋亡的调控作用.采用MTT法和台盼蓝染色法检测细胞增殖;亚甲基蓝法检测细胞内源性H2S的产生；PI/Hoechst双染法检测细胞凋亡；荧光探针法检测细胞内超氧阴离子及ROS水平;OxiSelectTM Total Glutathione Assay试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平；Westem blotting检测activated-caspase 3、p-AKT和Nrf2表达.结果显示,CSE抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)和CSE siRNA可明显降低细胞内H2S水平,可呈剂量和时间依赖性地抑制HepG2细胞增殖.PAG和CSE siRNA均可明显增加HepG2细胞凋亡率以及细胞内超氧阴离子和ROS的水平,降低细胞内GSH水平.CSE siRNA引起的ROS水平升高及GSH水平降低可被重组质粒pcDNA 3.1/myc-His(-)-CSE恢复.CSE siRNA可促进caspase 3的活化,但不会影响p-AKT及Nrf2蛋白的表达.结果表明,内源性CSE/H2S系统可通过氧化应激调控HepG2细胞的增殖及凋亡.
-
不同月龄大鼠阴茎海绵体内CSE含量与勃起功能的相关性分析
目的:研究不同月龄大鼠阴茎海绵体内CSE(胱硫脒-γ-裂解酶)含量的变化与阴茎勃起功能之间的关系,探求勃起功能障碍发生的深层次原因.方法:2月龄、8月龄、16月龄及24月龄雄性Wistar大鼠分别10只,在相同环境下给予相同饲料喂养4周,用阿朴吗啡在每只大鼠的颈项背部行皮下注射后记录勃起次数.APO试验后测定每只大鼠的ICP/MAP.后测定各组大鼠阴茎海绵体组织内CSE的含量.结果:随着月龄的增加,各组大鼠阴茎勃起次数减少,5V电刺激下ICP/MAP的平均比值逐渐降低,阴茎海绵体内CSE的含量逐渐降低;阴茎海绵体内CSE的含量和相应的5V电刺激下ICP/MAP值之间均呈正相关.结论:随着月龄的增长,大鼠阴茎勃起功能逐渐减弱,与此同时,阴茎海绵体内CSE的含量逐步降低,这说明增龄中勃起功能障碍发生的原因之一可能是阴茎海绵体内源性CSE含量降低,导致因阴茎生成H2S量减少.
