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PBCA纳米粒介导的hTERT反义寡核苷酸对A549细胞的抑制作用
目的以聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)作为端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的影响.方法采用MTT法检测NPs的细胞毒性和细胞增殖情况;流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测5'-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后胞内荧光强度和ASODN各组(ASODN1-NP,ASODN2-NP和ASODN3-NP)转染细胞后细胞周期的变化;倒置显微镜观察A549细胞生长状态;免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达.结果NPs质量浓度超过2.5 g·L-1时细胞毒性较大.转染24 h后,FASODN-NP组较FASODN组胞内荧光明显增强(P＜0.01).与空白对照组和正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotide-nanoparticle,SODN-NP)组相比,ASODN-NP处理后A549细胞形态改变,细胞增殖减慢;各组细胞生长抑制率随时间延长而增高,72 h时ASODN1-NP,ASODN2-NP,ASODN3-NP各组高抑制率分别可达62.4%,44.6%和36.4%;细胞周期改变,细胞被阻滞于G1期,S期细胞明显减少(P＜0.01);且hTERT蛋白表达明显减少.结论NPs介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖、改变细胞周期及降低hTERT蛋白表达,对该细胞生长有明显抑制作用.
关键词： 聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒 端粒酶逆转录酶 反义寡核苷酸 A549细胞 -
NGF-PBCA-NP的制备与性能评价及其对体外AD细胞模型的保护作用
目的 制备神经生长因子-聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(NGF-PBCA-NP)并评价其性能,检测其对Aβ1-40诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)增殖抑制和细胞凋亡的作用. 方法 采用乳化聚合法制备NGF-PBCA-NP,透射电镜观察形态,紫外分光光度法检测包封率和载药量.PC12细胞用10μg/mL的Aβ1-40处理,制备体外AD细胞模型后,用NGF (NGF对照组)和NGF-PBCA-NP(NGF-PBCA-NP组)分别作用于细胞,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率. 结果 NGF-PBCA-NP呈圆球形,包封率为80.87％,载药量为19.88％.与NGF对照组相比,NGF-PBCA-NP组细胞增殖抑制程度减轻,细胞凋亡率下降,差异有统计学意义(P＜0.05).其中50 μg/L NGF-PBCA-NP处理后细胞增殖比达峰值. 结论 乳化聚合法制备的NGF-PBCA-NP,形态一致,包封率和载药量较高,性能稳定,在体外具有一定的神经细胞保护和修复作用.
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神经生长因子纳米粒透过AD大鼠血脑屏障的实验研究
目的:制备神经生长因子聚氰基丙烯酸丁酯(nenre growth factor-polybutylcyanoacrylate,NGF-PBCA)纳米粒并评价质量,探讨其在阿尔茨海默病(Akheimer's disease,AD)大鼠体内透过血脑屏障的情况.方法:采用乳化聚合法制备NGF纳米粒并评价质量;Wistar大鼠30只,D-半乳糖和Aβ1-40先后注射实验组大鼠脑室后经Morris水迷宫法鉴定,制备有效AD大鼠模型;实验组静注NGF纳米粒后,Morris水迷宫法检测动物学习记忆能力的变化;ELISA法检测动物脑内NGF含量改变.结果:NGF-PBCA-纳米粒呈圆球形,包封率为83.56%,栽药量为22.87%.与对照组相比,实验组动物找到平台时间明显下降,脑组织内NGF含量显著增加(P<0.01).结论:乳化聚合法制备的NGF纳米粒,可使AD大鼠学习记忆能力损伤程度减轻,可增加外源性NGF通过AD大鼠血脑屏障的数量.
关键词： 阿尔茨海默病 神经生长因子 聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒 血脑屏障
