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雷公藤内酯醇对人LNCaP细胞雄激素受体表达的调控及其机制
本文研究了雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对人前列腺癌LNCaP细胞内雄激素受体(androgen receptor,AR)表达影响的作用机制.采用实时定量PCR和Western blot方法检测TP处理后LNCaP细胞中AR的mRNA和蛋白表达的变化,以及使用TP和NF-κB抑制剂共处理后LNCaP细胞AR蛋白表达的变化;采用RF克隆法构建系列pGL3-AR启动子报告基因载体并转染至LNCaP细胞,检测TP对LNCaP细胞AR转录的调节作用;采用Western blot检测可能起调节作用的上游蛋白.结果表明,TP处理LNCaP细胞48 h后,LNCaP细胞AR的mRNA和蛋白的表达随着药物浓度增加而下降,同时AR靶基因PART1及前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)的表达也受到抑制;成功构建系列pGL3-AR启动子报告基因载体,测序结果表明,插入的目的序列正确且无碱基突变,转染LNCaP细胞后双荧光素酶报告基因检测系统证实其具有启动子活性;启动子报告基因实验结果表明,TP在转录水平下调AR的表达;与AR启动子活性相关的PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白表达下调.说明TP可能通过PI3K/AKT/NF-κB通路下调人前列腺癌LNCaP细胞AR的转录活性.
关键词： 雷公藤内酯醇 前列腺癌 雄激素受体 PI3K/AKT/NF-κB通路 -
牡丹苷A诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用和机制
目的:研究牡丹苷A对人肺癌A549细胞株的作用以及其诱导人肺癌A549细胞株凋亡机制.方法:本研究采用MTT法检测牡丹苷A对体外人肺癌细胞株A549增殖率的影响.Annexin Ⅴ/PI双标法检测牡丹苷A对A549凋亡率,蛋白免疫印迹法和细胞免疫细胞化学法分别检测牡丹苷A对A549细胞株PI3K,Akt,NF-κBp65,Bax,Bcl-2的表达,并采用PI3K/Akt/NF-κB通路的激动剂IGF-1和抑制剂wortmannin进一步探讨牡丹苷A对PI3K/Akt/NF-κB信号通路的作用.结果:牡丹苷A能够抑制A549的增殖,上调Bax蛋白的表达量,下调Bcl-2蛋白的表达量,Bcl-2/Bax比值显著降低,同时降低PI3K,NF-κBp65的蛋白表达,抑制Akt磷酸化.结论:牡丹苷A能够阻碍A549增殖,并促进其凋亡,其诱导凋亡的机制可能与抑制PI3K/Akt/NF-κB通路有关.
关键词： 牡丹苷A 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 PI3K/AKT/NF-κB通路
