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  • 19F型肺炎球菌荚膜多糖与载体蛋白P64K结合物的制备及免疫原性

    作者:周觉非;姚静;尹丹丹;陈思;杨溢尧;代洁;张珂;饶海林;李春阳;江山;张雪梅

    目的:采用改良胺化还原法,重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白(rP64K)作为载体蛋白,制备19F型肺炎球菌荚膜多糖(PN19F)结合物.方法:在胺化还原法的基础上,以1,6-己二酰肼(ADH)为分子臂,在碳二亚胺( EDAC)作用下衍化rP64K,蛋白衍化后再与多糖上的醛基反应,形成共轭结合.采用HPLC、电泳、免疫印迹等方法分析结合物,并将获得的结合物免疫NIH小鼠,用ELISA方法检测多糖IgG水平.结果:电泳和免疫印迹证明了结合物制备成功.动物免疫产生了高滴度的抗PN19F的抗体,并有免疫记忆发生.结论:新的结合方法和新的载体蛋白能有效提高结合效率,以本工艺制备PN19F蛋白结合疫苗是可行的.

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