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重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)文献资料
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注射用重组人钙调磷酸酶B亚基稳定性的初步研究
目的:对注射用重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的稳定性进行初步研究,以确定其贮藏条件和有效期.方法:采用毛细管区带电泳(CZE),反相高效液相色谱(RP-HPLC),十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)非还原电泳、蛋白质含量测定Bradford法、圆二色谱(CD)、pH值、生物学活性等检测方法,对rhCNB在贮藏温度条件下的稳定性进行了系统研究.结果及结论:3批注射用rhCNB于2℃～8℃贮藏24个月,各项指标:外观、pH值、蛋白含量、纯度、肽图谱、相对分子质量、CD光谱蛋白质二级结构及生物学活性均无明显变化,稳定性好,有效期可暂定为2年.
关键词： 重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB) 稳定性 蛋白质二级结构 有效期 -
重组人钙调磷酸酶B亚基的毛细管区带电泳分析方法
目的:建立毛细管区带电泳(CZE)分离分析重组人钙调磷酸酶B亚基的新方法.方法:用毛细管区带电泳分离模式,采用未涂层熔融石英毛细管50 μm×57 cm;电泳缓冲液:0.2 mol·L-12-吗啉代乙磺酸-0.05mol·L-1柠檬酸盐-乙腈(5:5:1,pH 2.5);分离电压:15 kV;柱温:25℃;压力进样5 s;检测波长:214 nm,进行纯度分析.结果:所建立的CZE分析方法能够将重组人钙调磷酸酶B亚基与未知杂质有效分离,主峰的迁移时间及峰面积的RSD分别为0.31%和1.5%.结论:所建立的毛细管区带电泳方法可以用于重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度分析,它具有高效、快速、简便及样品和试剂消耗少等优点.
