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  • 人UGT1A3重组酶催化芹菜素葡醛酸结合反应

    作者:谢升谷;陈亚坤;陈枢青;曾苏

    目的 旨在了解人UGT1A3重组酶与芹菜素的有关代谢及其酶动力学参数,并阐述不同有机溶剂对酶动力学参数测定的影响.方法 采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶与芹菜素37℃共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,利用Lineweaver Burk法计算酶动力学参数,并进一步进行代谢物的确认.同时考察了用不同有机溶剂溶解底物对酶动力学参数测定的影响.结果 采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶,测得其催化芹菜素的Km为(28.88±2.47)μmol·L-1,Vmax为(224.19±21.11)nmol·min-1·g-1,Vmax/Km为(7.75±0.29)mL·min-1·g-1.不同有机溶剂对酶动力学参数测定无显著影响.结论 芹菜素可被人UGT1A3重组酶催化,进行葡醛酸结合反应.

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