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黄芩苷对人胃癌 SGC-7901细胞增殖抑制作用及其机制研究
目的：探讨黄芩苷对人胃癌 SGC-7901细胞增殖抑制、诱导凋亡作用及其分子作用机制。方法 MTT 法检测黄芩苷对 SGC-7901细胞的增殖抑制作用；PI 单染法检测细胞周期；Annexin V/PI 双染法检测细胞凋亡；Western blot 法检测凋亡相关基因 Bcl-2和 Bax 的蛋白表达水平。结果黄芩苷对 SGC-7901细胞生长有明显抑制作用，作用24 h 和48 h 对 SGC-7901细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为218.73μmol·L-1，161.86μmol·L-1，呈现时间—剂量依赖性；FCM 结果显示黄芩苷能使 SGC-7901细胞阻滞在 G2/M 期；Annexin V/PI 双染法验证黄芩苷可以诱导细胞凋亡；Western blot 结果显示 Bax 蛋白水平明显上调，而 Bcl-2的蛋白表达水平降低。结论黄芩苷对 SGC-7901细胞增殖具有显著的抑制作用并可诱导细胞凋亡，其作用机制与其上调 Bax 蛋白表达水平的同时，下调 Bcl-2蛋白表达水平，从而诱导细胞凋亡有关。
关键词： 黄芩苷 胃癌 SGC-7901 细胞 增殖抑制 机制 -
丹参寒热药性的实验评价
目的：通过前期建立的中药寒热药性的细胞评价方法评价中药丹参的寒热药性。方法用噻唑蓝（MTT）比色法考察丹参对 SGC-7901细胞体外增殖的影响，倒置显微镜观察丹参对细胞形态特征的影响，台盼蓝染色法分析丹参的细胞毒作用。结果丹参在所选浓度5~800μg / mL 内对 SGC-7901细胞增殖的影响表现为抑制。形态学观察表明丹参能使细胞密度减小，细胞固缩变圆，颗粒感增加。台盼蓝染色表明丹参对这两种细胞没有细胞毒作用。结论丹参性寒，与《本经》《本草纲目》《中药学》所述一致，对所用细胞没有细胞毒作用。
关键词： 丹参 MTT 法 SGC-7901 细胞 台盼蓝染色 -
miRNA-34a 对人胃癌 SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响
目的：研究 microRNA-34a(mir-34a)在人胃癌细胞中的表达水平及对胃癌 SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响。方法通过实时定量 PCR(RT-PCR)检测人正常胃黏膜上皮细胞 GES 及人胃癌细胞株 AGS、SGC-7901、MKN-45、BGC-823中 mir-34a 的表达水平。体外将表达人 mir-34a ( has-mir-34a)慢病毒感染人胃癌 SGC-7901细胞。荧光显微镜观察评估细胞感染情况,MTT 实验、流式细胞术检测感染后胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期及凋亡情况。结果胃癌细胞 AGS、SGC-7901、MKN-45、BGC-823中 mir-34a 的表达水平较正常胃黏膜上皮细胞 GES 明显降低,其中以胃癌 SGC-7901细胞降低为明显(P <0．01)。与阴性对照组相比, mir-34a 感染组 SGC-7901细胞增殖明显减慢( P <0．01), G1/ G0期细胞比例显著增加(P <0．05),细胞凋亡率显著升高(P <0．01)。结论 mir-34a 在多种人胃癌细胞,尤其是SGC-7901细胞中呈低表达。 mir-34a 可以抑制胃癌 SGC7901细胞的增殖,诱导细胞周期停滞及细胞凋亡。
关键词： 胃癌 SGC-7901 细胞 微小 RNA microRNA-34a 增殖 凋亡 -
Cystatin M抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖和迁移
目的： CST6基因编码 cystatin M蛋白，体外构建CST6过表达载体，转染胃癌 SGC-7901细胞株，观察 cystatin M对其增殖和迁移能力的影响。方法实验分3组：pcDNA3.1(+)-CST6组、pcDNA3.1(+)组与未转染组；RT-PCR验证稳转系 SGC-7901/CST6细胞 CST6 RNA 水平的表达；Western blot 验证稳转系 SGC-7901/CST6细胞CST6蛋白水平的表达；MTT实验检测实验组与对照组细胞的增殖能力；划痕实验检测实验组与对照组细胞的迁移能力。结果稳转系 SGC-7901/CST6细胞稳定表达CST6基因mRNA和 cystatin M蛋白；pcDNA3.1(+)-CST6组细胞增殖能力和迁移能力均较 pcDNA3.1(+)组和未转染组细胞降低(P<0.05)。结论 Cystatin M能够抑制胃癌SGC-7901细胞株增殖和迁移能力。
关键词： CST6 基因 Cystatin M 胃癌 SGC-7901 细胞 增殖 迁移
