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钙黄绿素脂质体的细胞转运及其机制研究
目的 研究钙黄绿素脂质体的细胞转运及其入胞机制.方法 用薄膜分散法制备钙黄绿素脂质体,比较钙黄绿素水溶液和脂质体的体外释放过程,研究脂质体包裹对钙黄绿素在A549细胞内蓄积、分布和入胞途径的影响.结果 钙黄绿素脂质体具有良好的缓释作用,可释放长达1周.相对于钙黄绿素水溶液,脂质体包裹使被动跨膜的钙黄绿素通过大胞饮和网格蛋白(clathrin)介导的内吞途径入胞,大幅度提高钙黄绿素入胞量,主要分布于溶酶体内.结论 小分子水溶性药物可以通过脂质体包裹改变入胞途径,提高入胞能力,影响胞内分布.该结论为研究载有水溶性药物脂质体的细胞递送过程,进一步合理设计脂质体处方提供参考和依据.
关键词： 缓释 细胞摄取 大胞饮 clathrin介导内吞 钙黄绿素 -
大胞饮途径介导血管平滑肌细胞内脂滴聚集
目的 探讨大胞饮途径是否介导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内脂滴聚集.方法 组织块贴壁培养法培养VSMCs;免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;天然低密度脂蛋白(nLDL,50、200、800 μg/mL)及脂多糖(LPS,200 ng/mL)刺激培养VSMCs,构建泡沫细胞模型;流式细胞术检测VSMCs对大胞饮示踪剂Lucifer Yellow (LY)和DiI标记的nLDL (DiI-nLDL)的摄取;油红O染色鉴定VSMCs内脂滴聚集.结果 ①LPS刺激可促进VSMCs对nLDL呈浓度依赖性地摄取增加,导致细胞内脂滴的聚集逐渐增多.②200 ng/mL LPS刺激VSMCs 6 h,VSMCs对LY的摄取增加75％(P＜0.01),对DiI-nLDL的摄取增加76％ (P ＜0.01).③应用胞饮抑制剂LY294002后,VSMCs对DiI-nLDL的摄取减少约29％ (P ＜0.01),VSMCs内脂滴聚集明显减少.结论 LPS刺激诱导VSMCs通过大胞饮途径摄取nLDL,从而增加细胞内脂滴的聚集,促进平滑肌源性泡沫细胞形成.
