首页 > 文献资料
-
南瓜蛋白对人胰腺癌细胞CFPAC-1增殖抑制及诱导凋亡作用
目的 探讨南瓜蛋白(CUS)体外对人胰腺癌细胞CFPAC-1的增殖抑制及诱导凋亡作用.方法 甲基噻唑基四唑法检测南瓜蛋白对CFPAC-1细胞的增殖抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,蛋白质印迹法检测caspase-3及bcl-2蛋白表达水平.结果 不同浓度(0.031 25、0.0625、0.125、0.25、0.5、1及2 μmol·L-1)南瓜蛋白作用不同时间(24、48及72 h)后,南瓜蛋白对胰腺癌细胞有增殖抑制作用,并呈时间和剂量依赖性(P＜0.05).1μmol·L-1南瓜蛋白作用72 h后,电镜下可见明显凋亡改变,并可见凋亡小体.流式细胞仪结果示,与对照组相比,S期细胞减少,G0/G1期细胞增多,细胞由G0/G1期进入S期延缓;不同浓度(0、0.062 5、0.25及1μmol·L-1)南瓜蛋白作用72h后细胞凋亡率分别为(0.33±0.37)％、(19.26±1.49)％、(37.13±2.07)％及(55.64±2.91)％.随着药物浓度的增高,caspase-3蛋白表达逐渐增强,bcl-2蛋白表达逐渐减弱.结论 南瓜蛋白对人胰腺癌细胞CFPAC-1具有明显抑制作用;南瓜蛋白可能通过上调caspase-3及下调bcl-2蛋白表达诱导胰腺癌细胞凋亡.
-
慢病毒绿色荧光蛋白感染人胰腺癌细胞株CFPAC-1的效率观察
目的:观察慢病毒-绿色荧光蛋白(Lentivirus-green fluorescent proteins,慢病毒-GFP)感染人胰腺癌细胞株CFPAC-1的效率,为后继的利用慢病毒载体来介导RNA干扰(RNA interference,RNAi)实验作准备.方法:应用慢病毒-GFP感染CFPAC-1细胞,在感染后不同的时间段在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白GFP的表达情况并计算感染效率.结果:慢病毒-GFP感染CFPAC-1细胞从60～72小时开始可见明显的绿色荧光.在感染复数(muhiplicity ofinfection,MOI)=10时,CFPAC-1细胞的慢病毒感染效率在60小时左右可达80%以上,72小时～7天基本能够达到90%的感染效率,在此后4周内作连续观察,感染效率仍维持在80%～90%.结论:慢病毒可稳定感染人胰腺癌细胞株CF-PAC-1,且效率高,可作为载体对该细胞株进行RNAi实验.
