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美白中药之水及乙醇提取物对酪氨酸酶抑制功效之比较
目的鲁府禁方内之八白散为我国有名的美容方剂,有着使皮肤白晰的作用.本研究旨在观察方中个别中药水提物之活性,及探讨使用80%乙醇作替代提取媒介之可行性.方法通过酪氨酸酶活性之抑制测试,并用曲酸作阳性对照,来评价个别中药水提物之有效程度.并将抑制作用明显较高的中药用80%乙醇提取,以和其水提物作一对比.结果白蔹水提物的抑制作用高,白芷及白及之水提物也有相当高的抑制效果.但白蔹、白芷及白及之80%乙醇提物抑制酪氨酸酶效果较差,其IC50比水提物之数值大5.9～23.8倍左右.结论在提取白蔹、白芷及白及作美白用途时,在单纯考虑其提取物生物活性之基础上,水比80%乙醇为更好的提取媒介.
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连翘抑制酪氨酸酶活性体外实验反应体系研究
目的 研究连翘抑制酪氨酸酶活性实验在微孔板检测系统中适宜的反应体系.方法 以连翘两个极性部位的萃取物为受试对象,将反应总体积定为200μl,保持底物L-酪氨酸的体积40μl不变,依次变化酪氨酸酶和溶剂二甲亚砜的体积,在37℃环境下每2 min检测一次吸光度A475,持续40 min,以不含药时吸光度的变化值或含药时的酪氨酸酶活性抑制率作为参考指标,从酶体积、二甲亚砜体积及孵育时间等变化因素分析此实验适宜的反应体系.结果 ①吸光度值随着酶体积的增加而增高.酶体积为70μl时,吸光度值高.不同酶体积的反应体系分别在20～26 min之间出现大吸光度变化速率.②吸光度值随着二甲亚砜体积增加而增高.二甲亚砜终体积分数为5％时,样品溶解程度和线性关系均较2％时好.结论 此实验适宜的反应体系为:底物L-酪氨酸40μl,酶体积70μl或以下,加入适量pH6.8缓冲液和受试药物,使二甲亚砜的终体积分数为5％,体系总体积为200μl,恒温37℃下孵育20～26 min之后检测.此反应体系为下一步研究连翘抑制酪氨酸酶活性实验提供基础,也为其他药物的同类实验提供方法学参考.
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连翘不同极性部位对酪氨酸酶活性抑制作用研究
目的 研究连翘对酪氨酸酶活性的抑制作用.方法 将连翘用80％的乙醇水溶液回流提取,得到总提取物,再用不同极性的有机溶剂石油醚、二氯甲烷、正丁醇进一步萃取,得到不同极性部位.将总提取物和各部位浸膏溶于不同体积的溶剂,以L-酪氨酸为底物,加入酪氨酸酶,使终浓度为1.0,0.5,0.2,0.1,0.04mg·ml-1,测定药物干预前后反应体系在475 nm波长处吸光度值变化,计算各组分对酪氨酸酶活性的抑制率.结果 在各组分中,连翘的二氯甲烷部位对酪氨酸酶活性的抑制率高,当终浓度为1.0 mg·ml-1时,抑制率为57.3％,抑制率随着浓度的增加而升高,其IC50为0.57mg·ml-1；其他组分也均有不同程度的抑制作用,其中正丁醇部位、水溶部位和总提取物随浓度的增加具有双向调节作用.结论 连翘具有较好的抑制酪氨酸酶活性的作用,可以抑制黑色素的形成.此实验为进一步研究连翘中酪氨酸酶活性抑制成分及其作用机理提供基础.
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不同灵芝提取物的美白及抗衰作用研究
目的 探讨不同灵芝提取物的美白和抗衰作用,选择适合于化妆品开发的原料.方法 以清除羟自由基、清除超氧阴离子、清除DPPH作用以及酪氨酸酶抑制活性为评价指标,研究灵芝水提取物和醇提物的抗衰和美白活性.结果 6种灵芝的醇提物和水提物对DPPH都具有很强的清除作用,其中ZLd水提物作用强,IC50为0.03 g·L-1.仅ZLd水提物和醇提物同时具有清除超氧阴离子的作用.ZLb、ZLc及ZLd的提取物同时具有清除羟自由基的作用,其中ZLd的水提物对羟自由基清除作用好,IC50值为7.14g· L-1.6种灵芝的醇提物具有很强的酪氨酸酶抑制活性,其中ZLd作用强.而6种灵芝水提物的酪氨酸酶抑制活性较醇提物弱,在10 g·L-1浓度时ZLd具有较高的活性,抑制率为66.77％.结论 ZLd适合成为抗衰及美白化妆品开发的原料.
