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共刺激分子B7在肾细胞癌的表达及意义
目的:检测B7基因在肾细胞癌的表达及其与肾细胞癌分级、分期及预后的关系.方法:本文应用RT-PCR和免疫组织化学技术检测了22例肾细胞癌组织B7的表达.结果:RT-PCR 5例阳性,免疫组化4例阳性,B7 mRNA表达与肾癌病理分级、分期无关系;病理切片HE染色显示,B7阳性肿瘤组织内淋巴细胞浸润明显增多.结论:表达B7的肿瘤组织局部抗肿瘤免疫反应增强,提示B7表达可能与肿瘤预后有关.大部分泌尿系肿瘤不表达B7,为转B7基因治疗泌尿系肿瘤提供了理论依据.
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Caspase-6诱导肾癌细胞株GRC-1细胞凋亡的研究
目的探讨Caspase-6在肾癌细胞株GRC-1中的表达及其对肾癌细胞的凋亡诱导作用.方法应用RT-PCR方法检测了肾癌细胞株GRC-1中Caspase-6基因的表达水平;以腺病毒adv 5作载体,构建了含Caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染GRC-1细胞株,用RT-PCR方法检测转染后GRC-1细胞中Caspase-6基因的表达.MTT法检测转染Caspase-6对GRC-1细胞株生长的影响.结果肾癌细胞株GRC-1中未检出Caspase-6表达.RT-PCR法证实转染Caspase-6后GRC-1中Caspase-6表达明显,MTT检测显示对GRC-1细胞的生长有抑制作用,通过形态学观察及DNA电泳证实这种作用主要是通过促进细胞凋亡而实现的.结论 Caspase-6对肾癌细胞的生长有抑制作用,并可诱导肾癌细胞凋亡.
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重组Endocan转染MDCK细胞对其表达骨桥蛋白的影响
目的 构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-Endocan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 应用PCR从pET 28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导人pcDNA 3.1/myc-his A多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA 3.1-Endocan;瞬时转染MDCK细胞,Western blot检测Endocan和OPN表达.结果 经双酶切鉴定及测序分析表明Endocan已经克隆到pcDNA 3.1/myc-hisA中.Western blot结果表明转染成功,Endocan表达量增加,且OPN随其而增加.结论 Endocan可促进MDCK表达OPN.
