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健脾益气化瘀解毒方含药血清对结肠癌 HCT116细胞增殖、周期、凋亡的影响
目的：探讨健脾益气化瘀解毒方含药血清对人结肠癌 HCT116细胞增殖、周期、凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），凋亡相关蛋白 Bcl-xL 和 Bax 蛋白表达的影响。方法10％、15％、20％健脾益气化瘀解毒方含药血清处理 HCT116细胞12、24、48、72 h 后，MTT 法检测细胞增殖；不同浓度含药血清处理24、48 h 后，碘化丙啶染色法检测细胞周期及凋亡率。蛋白质印迹法（Western blot）检测 HCT116细胞内 Caspase-3，Bcl-xL 和 Bax 蛋白的表达；对照组均予以相同浓度空白鼠血清及10％胎牛血清（FBS）。结果细胞增殖：12 h 后15％、20％含药血清与相同浓度鼠空白组比较，对 HC116细胞的抑制作用具有统计学意义（P ＜0．05），72 h 对 HCT116细胞的抑制作用强（P ＜0．05），健脾益气化瘀解毒方含药血清对 HCT116细胞增殖具有良好的抑制作用，并与时间、浓度呈正相关。细胞周期：10％及15％含药血清组 G2期细胞减少，而 G1期与 S 期细胞增多，20％含药血清组 G1期与 S 期细胞减少，而 G2期细胞增加，48 h 作用明显，而空白鼠血清细胞周期则无明显变化，说明含药血清能阻滞细胞周期，与时间呈正相关。细胞凋亡：与相应浓度对照组比较，含药血清处理24、48 h 后，HCT116细胞晚期凋亡率增加，并且随浓度、时间增加凋亡率增加（P＜0．05），说明含药血清能促使 HCT116细胞凋亡，与时间、浓度呈正相关。Western blot 检测显示，与空白鼠血清组相比，15％含药血清可上调 Bax 蛋白表达，下调 Caspase-3、Bcl-xL 的蛋白表达（P ＜0．05）。结论健脾益气化瘀解毒方可能通过将结肠癌 HCT116细胞周期阻滞，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，通过上调凋亡相关蛋白 Bax，下调 Caspase-3、Bcl-xL 蛋白的表达诱导细胞凋亡。
