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电针对控制性超排卵小鼠子宫内膜磷酸化胰岛素样生长因子-1受体表达及其信号转导通路的调控
目的 观察电针对控制性超排卵(COH)小鼠子宫内膜胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)表达及丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)、磷酯酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)信号转导通路的影响,探讨电针改善胚胎着床的作用机制.方法 将昆明纯种性成熟雌性小鼠随机分成自然周期组、COH组、电针组、电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组、电针+PD-98059组(其中BMS-536924、LY-294002、PD-98059为IGF-1R、PI3K、MAPK阻断剂的名称),每组20只,每组又分为供体鼠和受体鼠.采用控制性超促排卵长方案制备动物模型,并于注射绒毛膜促性腺素(HCG)日取关元、中极、三阴交行电针治疗,1次/d,至取材停止针刺.取供体鼠受精卵体外培养后移植至同组同日见阴栓的受体鼠子宫内,观察临床妊娠率和胚胎着床位点数,用Western blot法检测子宫内膜IGF-1R、磷酸化胰岛素样生长因子-1受体(p-IGF-1R)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的表达.结果 COH组妊娠率、平均着床位点数和子宫内膜IGF-1R、p-IGF-1R、p-Akt、p-ERK1/2的表达均较自然周期组低(P<0.05或0.01),电针组、电针+LY-294002组、电针+PD-98059组各项指标均较COH组显著性增加(P<0.05或0.01),但电针+BMS-536924组妊娠率、平均着床位点数未见明显改善,且p-IGF-1R表达显著性低于自然周期组(P< 0.01).电针+BMS-536924组、电针+LY-294002组、电针+PD-98059组相比较,电针+PD-98059组p-Akt蛋白和电针+LY-294002组p-ERK1/2蛋白表达较高,其差异具有统计学意义(P< 0.01).结论 电针改善COH小鼠胚胎着床可能与上调p-IGF-1R表达及PI3K/Akt、MAPK/ERK1/2信号转导通路有关.
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骨癌痛小鼠血清IGF-1和脊髓背角磷酸化IGF-1受体表达变化
目的 探讨骨癌痛小鼠血清胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)和脊髓背角磷酸化的IGF-1受体的表达变化.方法 雄性C3H/HeJ小鼠60只,体质量18~22 g,采用随机数字表法,将其分假手术组(Sham组,n=30)和骨癌痛组(Tumor组,n=30).Tumor组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种NCTC纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型.两组分别于肿瘤细胞接种前1 d、接种后4 d、7 d、10 d、14 d、21 d记录机械缩足阈值(PWMT)和自发抬足次数(NSF)(n=8/组).取4只小鼠进行眼球取血,术后14 d小鼠眼球取血后进行组织灌注取腰段脊髓.酶联免疫吸附法检测两组接种前1 d、接种后4 d、7 d、10 d、14 d、21 d血清中IGF-1的表达,免疫荧光法检测两组造模后14 d脊髓L3~5节段中磷酸化 IGF-1受体蛋白的表达(每组 n=6).结果 与 Sham 组相比,Tumor 组PWMT术后7~21 d降低(P<0.05),NSF术后7~21 d增加(P<0.05).与基础值和Sham组比较[基础值(27.33±0.52)pg/ml、Sham组(29.11±1.86)pg/ml、(24.51±3.61)pg/ml、(23.33±4.59)pg/ml、(25.29± 2.99)pg/ml],Tumor 组血清中 IGF-1表达在术后7~21 d 增高[(39.76 ± 3.92)pg/ml、(36.93 ± 2.18)pg/ml、(38.85±2.40)pg/ml、(39.70±2.62)pg/ml](P<0.05).Tumor组术后14 d脊髓中磷酸化IGF-1受体免疫荧光强度[(2.40±0.11)]高于Sham组[(0.05±0.01)](P<0.05).结论 骨癌痛小鼠血清中IGF-1和脊髓背角磷酸化IGF-1受体表达增加,该变化可能参与了骨癌痛的发生和维持.
