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RNAi构建parp-1基因低表达的石英恶性转化细胞模型
目的 构建多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1[poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP-1]基因低表达的石英恶性转化人支气管上皮细胞(M-16HBE)模型.方法 利用RNA干扰(RNA interferencing,RNAi)技术建立parp-1基因低表达的M-16HBE模型;采用反转录PCR( reverse transcription-PCR,RT-PCR)法检测不同组别(空白对照组、阴性对照组和质粒转染组)M-16HBE 的parp-1基因mRNA表达情况;应用MTT方法检测细胞的增生活性;应用流式细胞术检测细胞周期的变化情况.结果 质粒转染组M-16HBE的parp-1基因mRNA表达水平较空白对照组及阴性对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),表达量约为正常细胞的45%;阴性对照组与空白对照组M-16HBE的parp-1基因mRNA表达量相比,差异无统计学意义(P>0.05).与空白对照组相比,质粒转染细胞的增生能力显著增强,S期细胞比例升高了7.8%,G2期细胞比例下降了5.8%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Parp-1基因低表达M-16HBE模型构建成功.
关键词: RNA干扰 多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1基因 细胞周期