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含L(DLR类)A重复分拣蛋白相关受体文献资料
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基因重组型人SORL1蛋白质片段的原核表达和纯化
目的 制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础.方法 采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923 ～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中.用大肠杆菌BL21( DE3) plysS表达重组质粒,用液相色谱法纯化基因重组蛋白.结果 PCR扩增产物为358 bp,其ATG和TGA之间的结构与人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp区完全一致.基因重组质粒在大肠杆菌BL21( DE3) plysS中高效表达,其表达产物存在于包涵体组分中.纯化的基因重组蛋白在SDS-PAGE中表现为单一条带,表观分子量约为13 000.结论 人sorl1 cDNA的5 923 ～6 260 bp片段在原核细胞中大量表达,纯化后的基因重组蛋白可尝试用于抗体的制备.
