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  • Genistein对大鼠卵巢颗粒细胞CYP19表达的影响

    作者:温海霞;孟毅;杨永斌;殷立维;张若瞳

    目的 观察大豆异黄酮主要活性成分金雀异黄素(Genistein)对大鼠卵巢颗粒细胞CYP19表达的影响,探讨可能的分子机制.方法 选择25~28日龄的雌性大鼠21只,采用孕马血清促性腺激素(PMSG)皮下注射法建立促卵泡发育模型,分离颗粒细胞进行培养.实验分为0、0.1、1、5、10、100μmol/L Genistein组、17β-E2(10 nmol/L)组、雌激素受体(ER)-α阻断剂Tamoxifen(1μmol/L)预处理30 min后加Genistein(1和10 μmol/L)组,空白对照组即0μmol/LGenistein组.各组细胞处理48 h后,采用RT-PCR法检测CYP19及其上游调控基因肝受体类似物(LRH-1)mRNA的表达.结果 1、5和10 μmoFL Genistein组CYP19和LRH-lmRNA的表达高于空白对照组(P<0.05);而100 μmol/L Genistein组CYP19和LRH-1 mRNA的表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).与10 μmol/L Genistein相比,Tamoxifen(1μmol/L)预处理细胞30 min后再加入10 μmol/L Genistein组LRH-1 mRNA的表达明显下降(P<0.05),而CYP19 mRNA的表达则未受Tamoxifen的影响(P>0.05).结论 l、5和10μmol/L Genistein可明显上调大鼠卵巢颗粒细胞CYP19和LRH-1 mRNA表达,但这种促进作用可能并非通过ER-α介导.

  • 大豆异黄酮及主要活性成分Genistein对大鼠卵巢LRH-1基因表达的影响

    作者:庞海燕;孟毅;赵薇;刘国艺;温海霞

    目的 观察大豆异黄酮(soy isoflavones,SI)及主要活性成分Genistein对初老大鼠卵巢及体外培养卵巢颗粒细胞中肝受体类似物-1(liver receptor homolog-1,LRH-1)基因表达的影响,初步探讨大豆异黄酮作用于卵巢的分子机制.方法 采用自然老化法建立围绝经期大鼠动物模型,分别给予低剂量(50mg/kg)、中剂量(158 mg/kg)、高剂量(500 mg/kg)的SI灌胃处理8 w.分别采用原位杂交和RT-PCR检测卵巢组织中LRH-1 mRNA的表达.采用大鼠孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG)皮下注射法建立促卵泡发育模型,分离、培养颗粒细胞24 h后,给予大豆异黄酮主要活性成分Genistein (0、0.1、1、5、10、100 μmol/L)以及雌激素受体(estrogen receptor,ER)阻断剂ICI182、780(1μmol/L)继续处理细胞24 h,采用RT- PCR方法检测卵巢颗粒细胞中LRH-1 mRNA的表达情况.结果 各剂量SI处理组卵巢LRH-1 mRNA的表达(低剂量0.563±0.037,中剂量0.926±0.127和高剂量1.223±0.134),与围绝经期模型组(0.460±0.082)相比均显著增加(P<0.05).1~10 μmol/L的Genistein作用卵巢颗粒细胞24 h,LRH-1 mRNA的表达(分别为0.844±0.042,0.879±0.056,0.882±0.079)与空白对照组(0.678±0.052)相比均增加,结果具有统计学意义(P<0.05).ER阻断剂ICI182,780预处理细胞30 min后再给予Genistein继续处理细胞24 h后,发现1~10 μmol/L的Genistein上调LRH-1表达作用,并未受ER阻断剂的影响.结论 一定剂量的大豆异黄酮可明显上调衰老卵巢LRH-1 mRNA的表达,1~10 μmol/L的Genistein可上调体外培养大鼠卵巢颗粒细胞中LRH-1 mRNA的表达,可能并非通过经典ER介导的.

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