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利用体内电脉冲增强治疗型HBV DNA疫苗细胞免疫反应的研究
目的:研究在初次免疫和加强免疫阶段分别使用不同的免疫模式能否增强HBV DNA疫苗的细胞免疫反应.方法:肌内注射10 μg HBV DNA疫苗的Balb/c小鼠根据电脉冲实施时间的不同选择两种免疫模式,DNA+EP或EP+3 d+DNA,按在初次免疫和加强免疫阶段免疫模式的不同组合次序进行分组.各组小鼠在实施加强免疫后第14天取脾细胞做抗原特异的IFN-γ ELISPOT检测和FACS分析.结果:在初次免疫和加强免疫阶段使用不同免疫模式的实验组与采用相同免疫模式的实验组相比,诱导的特异性IFN-γ T细胞频数和IFN-γ的CD8+T细胞百分比均增加了4倍以上,差异有高度统计学意义(P<0.01),而分别在初次免疫和加强免疫阶段实施的两种免疫模式的不同次序产生的细胞免疫效果之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:在初次免疫和加强免疫阶段利用体内电脉冲实施不同的免疫模式能显著增强HBV DNA疫苗在动物体内的细胞免疫效果.
关键词: HBVDNA疫苗 体内电脉冲 初次免疫-加强免疫策略 细胞免疫反应 -
治疗性HBV DNA疫苗诱导健康Balb/c小鼠细胞免疫应答的实验研究
目的 探讨治疗性HBV DNA疫苗对健康Balb/c小鼠表达Th1类细胞免疫应答的影响.方法 治疗性HBV DNA疫苗(pS2·S+pFP)以剂量(50μg+50μg)/只对Balb/c小鼠进行接种,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)、流式细胞术(FACS)分析特异性分泌IFN-γ阳性T细胞的免疫效果.结果 免疫6周时,实验组用HBsAg刺激后其诱生的IFN-γ细胞频数(34±15.3)较不用HBsAg组(4±4.4)高(P<0.05,t=5.65),也较同期空载体免疫对照组(3±3.6)高(P<0.05,t=5.21);治疗性HBVDNA疫苗诱导小鼠CD4+T细胞表达IFN-γ的百分比实验组[(0.28±0.17)%]与对照组[(0.20±0.03)%]比较,无显著性差异(P>0.05,t=0.21);而诱导CD8+T细胞表达IFN-γ的百分比实验组[(0.69±0.08)%]与对照组[(0.24±0.12)%]比较,具显著性差异(P<0.05,t=4.167).结论 治疗性HBVDNA疫苗能有效诱导T细胞分泌HBsAg特异性IFN-γ因子,并以CD8+T细胞分泌占优而发挥细胞免疫应答的优势.