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恒河猴 samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响
目的:筛查恒河猴 samhd1基因编码区单核苷酸多态性( coding-region single nucleotide polymorphism, cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件对该蛋白结构进行分析;使用SNaPshot方法筛查138只恒河猴基因背景。结果序列比对发现5个非同义突变位点C15G (2.17%)、C320T (6.88%)、G547A (13.41%)、A552T (4.35%)、T839C (17.39%);其中除C15G外的其它四个cSNP位点均处于SAMHD1蛋白重要结构域上,且G547A、A552T、T839C三个cSNP位点改变SAMHD1蛋白二级结构,可能影响SAMHD1蛋白功能。结论恒河猴samhd1基因编码区存在三个可能影响SAMHD1蛋白功能的cSNP位点,为后续研究提供了参考信息。
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恒河猴 BST-2基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的影响
目的:筛查恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性( coding-region single nucleotide polymorphism, cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴BST-2的cSNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行分析;比较不同基因型猴体内SHIVSF162 p3复制水平的差异。结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C cSNP位点可影响BST-2蛋白二级结构。在SHIVSF162 p 3感染平台期,参考基因型猴( DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(P <0.05),其他基因型猴之间无显著差异。结论 cSNP (G41A)可能影响BST-2的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息。