正常月经和异常子宫出血机制的新概念

月经周期末，黄体萎缩致使雌孕激素水平下降而来月经。 月经来潮的机制，目前认为主要涉及两个方面。一是血管活性的变化源于1940年Markee在恒河猴中所观察到月经前内膜血管收缩，继而扩张，导致组织缺血、坏死而出血。有学者认为子宫内膜特有的螺旋动脉是月经出血的基础。近年研究表明血管活性的变化主要受前列腺素、内皮素及一氧化氮等血管活性物质的影响。二是组织破坏。1961年Hisaw等发现，灵长类子宫内膜萎缩，螺旋动脉不复存在时仍有月经来潮，从而对前述观点提出异议。1991年Ludwing等发现在正常周期第28日，子宫内膜腔上皮显示灶性病变并迅速蔓延致内膜功能层大部退变，血管破口及腺体暴露。该论点在90年代开始才引起关注。近年研究认为，子宫内膜中基质金属蛋白酶与其组织抑制物间的平衡失调是导致组织破坏的原因。

柔红霉素恒河猴急性毒性试验

目的 测定受试品LD50,为重复给药毒性试验方案的设计及临床合理用药提供参考.方法 使用上下法(Up-and-down method,UPD),单次静脉注射(iv)给予恒河猴0.9％生理盐水(溶媒对照)及柔红霉素6.0、7.9、10.4、13.7、18.1和23.9 mg/kg剂量组,间隔48 h给予1只,观察动物死亡情况.结果 柔红霉素LD50=11.94 mg/kg,95％置信区间为10.4 ～ 13.7 mg/kg.结论 柔红霉素具有较为明显的延迟毒性,可致恒河猴白细胞明显减少,并对肝、肾及胃肠道具有一定毒性作用.

二香定痛散全方及拆方的急性毒性验/甘氨双唑钠对SD大鼠长期毒性试验/恒河猴膝关节给药rAAV2/hTNFR:Fc毒性研究

SPECT在犬肾功能检测中的应用/PEG IFN α-1b重复给药对恒河猴的毒性实验

恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织NF-κB活性及TNF-α、IL-1mRNA表达的实验研究

目的:探讨核因子κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)在恒河猴细菌感染性子宫出血模型中的变化.方法:选择月经正常的雌性育龄恒河猴7只,随机分为模型组4只和正常对照组3只,通过宫腔细菌接种制作细菌感染性子宫出血模型.用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测模型组及正常对照组恒河猴子宫内膜组织NF-κB与靶基因DNA的结合活性,用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测两组恒河猴子宫内膜组织TNF-α、IL-1mRNA的表达.结果:模型组NF-κB活性及TNF-α、IL-1mRNA的表达量均明显高于正常对照组,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:NF-κB活化及TNF-α、IL-1mRNA的高度表达可能参与了恒河猴细菌感染性子宫出血发病机制.

恒河猴精原干细胞的筛选、培养与鉴定

目的:建立恒河猴精原干细胞的筛选和培养方法.方法:采用改良的二步酶消化法分离恒河猴睾丸细胞,用改进的差异贴壁筛选法纯化恒河猴精原干细胞,用添加了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、可溶性GFRα1和bFGF的DMEM/F12无血清培养基和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养恒河猴精原干细胞,并通过形态观察、标志基因的免疫细胞化学分析和半定量RT-PCR分析鉴定培养细胞的干细胞活性.结果:分离纯化的恒河猴精原干细胞在添加了3种生长因子的培养基中能形成较大的干细胞克隆,并表达精原干细胞的标志基因.结论:本研究初步建立了恒河猴精原干细胞的培养体系,为进一步开展相关研究奠定基础.

恒河猴成为SARS疫苗研究"替身"

中药髓复康对恒河猴脊髓损伤后神经再生的影响

目的 髓复康对恒河猴脊髓损伤后神经再生的影响.方法 成年雄性恒河猴14只,其中10只用于制备T12胸髓左侧半横断损伤模型,并将其随机分为髓复康组(S)和模型组(M),每组5只,另外4只设为正常对照组(N).通过改良Tarlov法评估恒河猴脊髓神经功能恢复情况;采用原位杂交法检测各组髓鞘相关生长抑制因子(Nogo-A)和生长相关蛋白(GAP-43)的表达量.结果 给药30 d后,髓复康组患肢神经功能恢复优于模型组(P＜0.01);脊髓损伤后各手术组Nogo-A mRNA的阳性细胞数及阳性产物的OD值均明显升高,其中髓复康组Nogo-A mRNA的阳性细胞数和其阳性产物的OD值都明显低于模型组(P＜0.05).各手术组GAP-43 mRNA的阳性细胞数及其阳性产物的OD值均明显高于正常组(P＜0.01);其中髓复康组GAP-43 mRNA的阳性细胞数和其阳性产物的OD值高,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 中药髓复康能够对脊髓损伤后恒河猴脊髓中Nogo-A的表达有一定的抑制作用,同时能够上调GAP-43的表达,促进了脊髓损伤后恒河猴运动神经功能的恢复.

产前雄激素过剩与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征(PCOS)的病因尚不清楚.它是育龄期妇女普遍存在的家族性综合征.动物模型,拟态胎儿的雄激素分泌过多,可提供对PCOS 起源的独特的洞察.

恒河猴感觉皮层手区切除后的脑功能重组

目的：研究切除恒河猴感觉皮层手区对恒河猴感觉皮层脑功能重组的影响，探讨病理状况下大脑皮层对手区与面区感觉功能的调控作用是否发生代偿，揭示“面口合谷收”可能的生物学机制。方法：手术切除恒河猴感觉皮层手区，通过微电极细胞外记录寻找恒河猴感觉皮层 SⅠ神经元的放电，观察其外周感受野的变化。结果：恒河猴感觉皮层手区切除后3个月、6个月、9个月，手区神经元的外周感受野消失，随着切除时间的延长，在已切除的手区可逐步记录到数量不等对面部和前臂刺激起反应的神经元，对面部刺激起反应的区域明显大于对前臂刺激起反应的区域。结论：1）感觉皮层手区功能的丧失导致与其毗邻的面区、前臂之间发生功能重组，面区和前臂区均逐步向手区扩展。2）功能重组似乎有一定的趋向性，即面区和手区之间的功能重组强于前臂区和手区。3）病理状况下大脑皮层手区和面区的功能重组可能是“面口合谷收”重要的生物学机制。

三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在炎性子宫出血中的作用及三七复合有效成分的影响.方法:选择月经正常雌性育龄恒河猴11只,随机分为中药组(三七复合有效成分)4只、模型组4只及正常对照组3只.应用化学比色法检测三组子宫内膜中一氧化氮及一氧化氮合酶的活性,用免疫组化法检测三组子宫内膜中一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达水平.结果:中药组与模型组比较,子宫内膜N0、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平明显降低,差异有显著性,P＜0.01;结论:NO可能参与了炎性子宫出血的发病机制,三七减少炎性子宫出血的机制可能与调节N0、iNOS的活性及iNOS蛋白表达水平有关.

中药髓复康对恒河猴急性脊髓损伤后勿动蛋白mRNA及其蛋白表达的影响

和其阳性产物的OD值都明显低于模型组.结论:中药髓复康对脊髓损伤后恒河猴脊髓中Nogo-A的表达有一定的抑制作用,可能为神经的修复和再生提供有利的微环境.

青蒿素哌喹片对恒河猴经口给药急性毒性实验

目的:考察青蒿素哌喹片(ATQ)对恒河猴单次经口给药可能产生的的毒性反应,评价其安全性.方法:采用近似致死量法进行实验.对恒河猴单次经口给予青蒿素哌喹片,给药剂量为168,377,849,1 910,4 296 mg· kg-1,每个剂量1只动物,观察14 d内恒河猴的毒性反应和死亡情况,求得ATQ对恒河猴的近似致死剂量范围,称量体重、摄食量,检测血液学及血液生化学,对所有恒河猴解剖并进行大体病理观察.结果:所有恒河猴14 d内未出现死亡.4 296,1 910 mg·kg-1剂量ATQ可使恒河猴出现呕吐及摄食减少,其中4 296 mg· kg-1剂量组恒河猴体重减轻.结论:ATQ对恒河猴单次经口给药的近似致死剂量大于4 296 mg· kg-1(相当于临床剂量的257倍).

中研Ⅱ号对猴感染SIVmac251血清新喋呤水平的影响

目的:应用中药中研Ⅱ号复方观察对感染SIVmac251恒河猴血清新喋呤水平的影响.方法:通过中研Ⅱ号复方对感染SIVmac251的动物治疗后,检测其血清新喋呤水平的变化,观察中研Ⅱ号对模型动物的免疫调节作用.结果:中研Ⅱ号复方能降低感染动物血清新喋呤的水平.结论:中研Ⅱ号对SIV感染动物免疫功能具有保护作用.

三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织NF-κB活性的影响

目的探讨三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血NF-κB活性的影响.方法选择月经正常雌性育龄恒河猴11只,随机分为中药组(三七复合有效成分)4只、模型组4只及正常对照组3只.用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测三七复合有效成分组、模型组及正常对照组子宫内膜组织NF-κ B与靶基因DNA的结合活性.结果三七复合有效成分组NF-κ B活性明显低于模型组,三七复合有效成分组与正常对照组无显著性差异.结论NF-κB活化可能参与了恒河猴细菌感染性子宫出血发病机制,三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血的止血作用可能与其抑制NF-κB的活化有关.

中国恒河猴SIVmac239艾滋病模型亚急性期的实验观察

目的:观察SIVmac239中国恒河猴艾滋病模型亚急性期内T淋巴细胞亚群、病毒载量指标变化情况,探讨中国恒河猴艾滋病模型亚急性期病毒学相关指标变化特征.方法:采用SlVmac239病毒株静脉接种健康中国恒河猴复制中国恒河猴艾滋病动物模型,观察猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)感染后动物模型亚急性期内T淋巴细胞亚群指标变化、病毒载量变化情况.同时记录动物模型临床症状情况.结果:健康恒河猴接种病毒株后3个月体重及BMI指数比较稳定,各时间点差异不显著,在感染第10 ～14天病毒载量达到高峰(6.72±0.44)个1g,此后整体表现为水平波动下降趋势.T淋巴细胞亚群在感染后出现显著改变,CD3,CD4,CD8计数和百分比有不同程度的变化;CD4/CD8比值感染后2周内明显下降,一般在病毒载量高峰时表现为低比值为(0.86±0.29),随后比值缓慢波动上升.感染3个月内共有3只感染猴临床症状明显,其中1只出现腹泻、2只出现摄食下降等临床症状.结论:中国恒河猴艾滋病动物模型与国外印度恒河猴艾滋病动物模型亚急性期相似,研究内容为中国恒河猴应用于艾滋病模型研究的标准化建立补充了更详尽的亚急性期变化内容.

参附注射液对晚期猴艾滋病模型的影响

目的 观察参附注射液对晚期猴艾滋病(AIDS)模型的疗效及对临床预后的影响.方法 将10只恒河猴随机分为对照组和治疗组各5只,经静脉注射SIVmac239病毒株感染建立猴艾滋病模型,当猴AIDS模型进入艾滋病晚期时,对照组予常规西医对症治疗,治疗组在西医对症治疗基础上静脉推注参附注射液,20ml/次,每日1次,20天为1个疗程,每疗程间停药3天,连续治疗至猴死亡.观察两组存活时间、体重变化、精神状况、临床症状评分、组织病理学改变并检测T淋巴细胞亚群(CD4+％、CD4+/CD8+)、病毒载量.结果 两组治疗后死亡率、CD4+％、CD4+/CD8+比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组生存时间较对照组显著延长(P＜0.05)f治疗组病毒载量较对照组下降明显(P＜0.05)；两组治疗中摄食情况、精神活动情况、总评分比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 参附注射液对晚期猴AIDS模型在延长生存时间、减轻临床症状、延缓病情恶化速度、改善部分血液学指标方面疗效确切.

SV40对猴树突状细胞发育分化的影响

为探讨猴空泡病毒40对猴树突状细胞发育分化的影响,分别以灭活的SV40和感染性SV40作为刺激抗原致敏外周血来源的猴树突状细胞,培养第5 d加入刺激抗原,在培养第7 d和第9 d分别收集处理的猴树突状细胞并测定细胞表面分子CD1a、HLA-DR、CD86、CD83的表达情况.结果显示,与灭活的SV40抗原相比,经感染性SV40刺激的猴DC中前述四种表面分子的表达显著偏低(P

SIVmac251恒河猴感染疾病模型指标观察

建立猴免疫缺陷病毒(SIVmac251)感染恒河猴模型,为AIDS疾病模型研究提供基础数据.SIVmac2 51毒株经静脉接种感染5只恒河猴,定期静脉采血,进行病毒载量、T淋巴细胞亚群、病毒抗体、细胞因子检测.结果显示,在感染急性期,血浆病毒载量在接种病毒一周后达到高峰,高病毒血症维持约3到4周;CD3+ CD4+T淋巴细胞出现一过性下降,血浆中IFN-γ上升,IL-12下降,IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α维持在正常水平或未能检出.感染无症状潜伏期,血浆病毒载量维持在104 RNA拷贝/mL以上,疾病晚期出现上升或下降趋势;CD3+ CD4+T淋巴细胞逐渐下降;CD4/CD8在疾病晚期也下降;抗SIV抗体明显上升,血浆中IFN-γ、IL-12、IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α未出现明显的变化.通过对上述各项指标分析,SIV感染显示与人HIV感染相似的变化,是人AIDS研究较好的动物模型,本研究为SIV感染模型的建立和应用提供了基础数据.

恒河猴二次接种H5N1亚型禽流感病毒

对恒河猴进行二次接种H5N1亚型禽流感病毒试验,并对二次接毒的结果进行观察,评估初次接毒对恒河猴二次接毒效果的影响.首次接种试验中,3、4、5号恒河猴用环甲膜穿刺注射方法接种含有H5N1亚型禽流感病毒的尿囊液,6号猴接种不含病毒的尿囊液.90d后,再次用环甲膜穿刺注射方法二次接种,4、5、6号猴接种7mlTCID50浓度为104.875病毒的尿囊液,3号猴接种7ml不含病毒的尿囊液.进行抗体等检测,并分别于72h无痛处死3、4、6号猴,第7d无痛处死5号猴,进行肺的病毒检测及病理观察.结果显示,3、4、5号猴至试验结束时体内依然有较高的抗H5N1亚型禽流感病毒抗体水平,6号猴没有抗体;通过RT-PCR以及免疫组化染色进行病毒检测,均只在6号猴肺部检出病毒,且6号猴肺部病理损伤为严重.由此可以得出初步结论:在初次感染H5N1亚型禽流感病毒后90d,临床症状已基本恢复正常的恒河猴体内仍然有较高水平的抗体,此时,恒河猴抵抗H5N1亚型禽流感病毒二次感染的能力显著提高.