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Cchl1a3文献资料
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低钾型周期性麻痹相关的Cchl1a3基因R528H敲入小鼠模型的构建
目的：构建低钾型周期性麻痹相关的Cchl1a3基因R528H敲入小鼠模型。方法将 Cchl1a3-knock-in打靶载体电转染ES细胞，经过G418和Ganciclovoir筛选阳性ES细胞克隆并用PCR和DNA测序法鉴定。将阳性ES克隆注射到小鼠囊胚，获得嵌合体小鼠。通过杂交获得的杂合子小鼠与FLP小鼠交配繁育获得去neo杂合子小鼠，并用PCR和DNA测序进行鉴定。将去neo杂合子小鼠交配得到纯合子后代，进行生长发育等方面的观察。结果打靶载体成功转染ES细胞，PCR和DNA测序法证实9个ES细胞克隆发生正确的同源重组。通过显微注射获得7只嵌合体小鼠。将嵌合体小鼠交配繁育的杂合子小鼠和FLP小鼠交配获得9只去neo杂合子小鼠，终得到15只去neo纯合子小鼠。该小鼠在发育至性成熟阶段，精神、饮食及活动状态良好，但是在4个月龄时逐渐出现脱毛，皮肤破溃甚至死亡。结论成功构建Cchl1a3基因 R528H 突变的纯合子小鼠，为研究人类CACNA1S基因功能和阐明低钾型周期性麻痹发生的分子机制奠定了基础。
