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急性白血病不同阶段血小板膜糖蛋白的变化
目的：比较急性白血病不同阶段血小板膜糖蛋白CD42a、CD62p、PAC-1表达的差异，探讨应用血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD42a监测血小板的活化状态和预测急性白血病出血的可能性及不同阶段血小板膜糖蛋白表达与血小板聚集、黏附、活化功能之间的联系。方法急性白血病初次确诊未治组28例，急性白血病诱导后早期完全缓解组16例，长期完全缓解组（缓解期达两年以上）10例，正常对照组30例。用流式细胞仪检测微量全血血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63，二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）激活后检测PAC-1、CD62p、CD42a，观察百分率及平均荧光强度的变化。结果血小板计数、血小板平均体积、血小板压积进行比较，未治组显著低于其他组（P＜0.01）。不同阶段血小板膜糖蛋白百分率比较，ADP激活前未治组CD62p、PAC-1表达阳性率均高于其他组（P＜0.01）；早期完全缓解组CD62p、PAC-1表达阳性率高于长期完全缓解组、对照组（P＜0.01）。激活后，未治组及早期完全缓解组CD62p、PAC-1表达阳性率均高于对照组（P＜0.01）。CD42a表达阳性率在ADP激活前后各组间比较差异均无显著性（P＞0.05）。ADP激活前，未治组CD62p、PAC-1平均荧光强度高于其他组（P＜0.01），CD42a平均荧光强度低于其他组（P＜0.01）；与长期完全缓解组、对照组相比，早期完全缓解组CD62P、PAC-1平均荧光强度较高（P＜0.01），CD42a较低（P＜0.01）。激活后，未治组CD62p、CD42a平均荧光强度高于其他组（P＜0.01），PAC-1低于其他组（P＜0.01）；与长期完全缓解组、对照组相比，早期完全缓解组CD62P、CD42a平均荧光强度较高（P＜0.01），PAC-1较低（P＜0.01）。结论急性白血病初诊未治时外周血血小板活化增多，ADP激活后活化功能降低，黏附、聚集功能减低，诱导后早期完全缓解阶段血小板聚集、黏附、活化功能较初诊未治时有所恢复，但仍处于异常状态，长期完全缓解阶段血小板膜糖蛋白表达正常，其血小板功能亦恢复正常。
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不同相对分子质量mPEG-SPA修饰血小板CD42a效果差异分析
目的 观察mPEG-SPA对血小板抗原的修饰效果,并比较不同相对分子质量的mPEG-SPA修饰效果有无差别.方法 分别用相对分子质量为5000、20 000的mPEG-SPA对血小板CD42a进行化学修饰;流式法检测修饰前后CD42a荧光强度变化;模拟CD42a三维空间结构,分析赖氨酸区域在CD42a的分布情况.结果 经5000和20 000的mPEG-SPA修饰后,CD42a荧光强度与对照组相比明显降低,降低比例分别为85.54%和88.65%.CD42a分子表面表达多个赖氨酸区域.结论 5000和20 000的mPEG-SPA对血小板CD42a均具有良好的化学修饰作用,20 000的mPEG-SPA修饰效果优于5000 mPEG-SPA的修饰效果.
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CD42a定量检测血小板
目的探讨血小板(PLT)计数的参考方法.方法以FITC标记的CD42a单克隆抗体特异结合PLT膜糖蛋白Ib-Ix(GPIb-Ix),用流式细胞仪术(FCM)检测76例全血FITC-抗CD42a-GPIb/Ix定量PLT.用FCM测得PLT/RBC,乘以经准确校正的血细胞分析仪所测同一标本的RBC值,得PLT结果(×109/L).同时,将FCM所测PLT结果与SE-9500、NE-1500、CD-1600及手工法测定结果相比较. 结果 FCM批内重复性高值(501×109/L)及中值(184×109/L)标本的变异系数(CV)＜4%,低值(23×109/L)标本CV=11.432%;批间重复性CV为10.792 %,总重复性CV＜5%;PLT在20×109/L～700×109/L范围内线性良好(r=0.9975,P＜0.001).测定结果在标本采集后6小时内稳定,携带污染率为0.87%.FCM与SE-9500、NE-1500、CD-1600、手工法测定PLT结果间有良好相关性(r＞0.975).结论 FCM测定PLT-CD42a定量PLT特异、准确、精密,可望成为PLT测定的参考方法.
