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牛乳铁蛋白促进空肠上皮细胞株IEC-6细胞活性的研究
目的：探讨牛乳铁蛋白对大鼠空肠上皮细胞株IEC-6的细胞活性、增殖能力的影响。方法体外培养IEC-6细胞，MTT法检测不同浓度牛乳铁蛋白对IEC-6细胞的活性，Brdu标记检测牛乳铁蛋白对细胞增殖能力的影响，流式细胞术检测细胞周期。结果牛乳铁蛋白促进IEC-6细胞活性，且呈浓度依赖效应，牛乳铁蛋白处理浓度为100μg/ml时，IEC-6细胞活性显著上调（P＜0.05）。牛乳铁蛋白可通过调节细胞周期促进IEC-6细胞增殖，牛乳铁蛋白在100μg/ml时细胞Brdu增殖活性发生显著性上调（P＜0.05），在200μg/ml牛乳铁蛋白处理浓度时增殖能力达到顶峰。牛乳铁蛋白可通过调控IEC-6的细胞周期，从G1期向S期转化。结论牛乳铁蛋白可能通过调控细胞周期从G1期向S期转化，从而促进大鼠空肠上皮细胞株IEC-6细胞活性及增殖能力。
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牛乳铁蛋白对脂多糖体外诱导大鼠空肠上皮细胞炎症的抑制作用及机制
目的 探讨牛乳铁蛋白(bLF)在体外对大鼠空肠上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖和对脂多糖(LPS)诱导的细胞炎性反应的影响及机制.方法 体外培养IEC-6细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度bLF时IEC-6细胞的活性,5-溴脱氧尿苷(Brdu)标记检测bLF对细胞增殖能力的影响,荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA水平,Western blot检测bLF对LPS诱导的炎症信号通路中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子-κB(NF-κB)水平.结果 bLF在体外可促进IEC-6细胞活性和增生能力,并呈浓度依赖效应(F=3.825、5.861,均P<0.05),当处理质量浓度为100 mg/L时,IEC-6细胞活性和增殖能力逐渐增强(q=5.240、3.765,均P<0.05).应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可明显降低IL-1β、IL-6及 TNF-α 的mRNA表达水平(q=14.28、10.12、16.45,均P<0.001),并降低IL-6和TNF-α蛋白的表达(q=15.06、6.74,均P<0.001).与单独LPS组相比,应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可使MAPK/NF-κB通路的激活水平下降(q=12.96、18.54,均P<0.001).结论 bLF在体外可促进大鼠IEC-6细胞活性及增殖能力,并通过抑制MAPK/NF-κB信号通路起到抑制LPS诱导的炎性反应的作用.
