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基因表达连续分析标签数据库的实时定量多聚酶链反应验证
目的 采用实时定量多聚酶链反应(PCR)技术验证不同丰度和匹配度的基因表达序列标签,尝试用该技术补充和完善高通量基因表达谱的结果.方法 根据各基因序列全长设计引物,选择9个单匹配标签,6个多匹配标签,1个美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库更新后无匹配标签和2个无匹配基因进行实时定量PCR验证.结果 挑选的所有基因均得到特异性扩增.基因表达量分析结果显示,基因表达连续分析(SAGE)文库中9个单匹配标签表达趋势和定量结果一致,且具有显著性差别;6个多匹配标签中有3个标签表达趋势和定量结果一致,且具有显著性差别;1个NCBI数据库更新后无匹配标签表达趋势和定量结果相反;2个无匹配基因表达量数据提示两组间没有显著性差别.结论 实时定量PCR技术是验证SAGE等高通量数据的可靠工具之一.SAGE文库标签匹配度可影响数据的可信度.
关键词: 基因表达连续分析 实时定量多聚酶链反应 -
基因表达连续分析技术及应用研究的进展
随着功能基因组学研究的兴起,基因表达连续分析技术(SAGE)已成为高通量研究基因表达谱的新手段.SAGE技术不仅可以用来研究大部分基因组序列尚未鉴定的生物个体的基因表达谱,其实验结果还可以直接与发表在SAGEmap表达数据库中不同来源的已知文库相比较,应用日益受到重视.