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碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β1复合骨髓间充质干细胞对大鼠退变椎间盘的修复作用
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)以温敏性壳聚糖(TCH)为载体对大鼠退变椎间盘的修复作用.方法 针刺法建立SD大鼠椎间盘退变模型,4周后核磁共振下观察退变效果.体外培养BMSCs,并用含增强型绿色荧光蛋白的腺病毒转染使带有增强型绿色荧光蛋白基因,作荧光标记.将椎间盘退变的SD大鼠分成4组,实验组A组使用bFGF+ TGF-β1+ BMSCs+ TCH凝胶移植入退变的椎间盘中,B组和C组分别使用BMSCs+ TCH凝胶和bFGF +TGF-β1+ TCH凝胶,对照组D组使用PBS缓冲液.继续培养4周后核磁共振观察各组椎间盘的修复情况.HE、Masson染色、组织病理学观察各组椎间盘结构.逆转录PCR,Western blot检测各组髓核蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9、Ⅰ型胶原的表达.结果 移植注射的BMSCs能在椎间盘中生长,呈类髓核分化.核磁共振结果显示:A组髓核信号明显高于其他3组,B组高于C组,D组髓核信号低,硬脊膜受压,脊髓呈串珠状改变,各组间Pfirrmann分级结果差异有统计学意义(P＜0.05).HE、Masson染色显示:A组椎间盘结构完整,髓核细胞数量优于其他3组,髓核和纤维环界限清楚,B组髓核数量多于C组,B组纤维环未见断裂,而C组可见断裂的纤维环,D组髓核细胞被杂乱的纤维组织取代.逆转录PCR、Western blot显示:A组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9的表达高,B组优于C组,D组表达低(P＜0.05).而Ⅰ型胶原的表达在4组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 移植的BMSCs在退变椎间盘中能够存活,呈类髓核分化.bFGF+ TGF-β1+ BMSCs+ TCH凝胶复合体对退变的椎间盘具有明显修复作用.BMSCs+ TCH凝胶治疗退变椎间盘的效果优于bFGF+ TGF-β1+ TCH凝胶但低于bFGF+ TGF-β1+ BMSCs+TCH凝胶复合体.
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温敏性壳聚糖止血膜的止血作用及体内降解吸收
背景：尽管温敏性壳聚糖是壳聚糖的一种，但其止血效果、组织相容性及体内代谢吸收情况还需要验证。目的：探讨温敏性壳聚糖止血膜的止血作用、体内降解和组织相容性。
方法：取SD大鼠48只，随机均分为4组，同时进行两种实验：①制作肝脏创面出血模型，其中3组分别采用温敏性壳聚糖止血膜、纤维素止血棉和明胶海绵止血材料贴敷大鼠肝创面止血，以不做任何处理的为空白对照。记录出血时间及出血量。②在上述3组大鼠的股四头肌内分别再植入对应的止血材料，空白对照组不植入任何材料。术后1，2，3，4，6周取两处创面行大体观察，术后4周行苏木精-伊红染色和电镜观察。结果与结论：温敏性壳聚糖组、纤维素组止血时间和出血量少于空白对照组、明胶海绵组(P <0.05)。温敏性壳聚糖止血膜于术后6周完全降解，纤维素止血棉于术后3周完全降解，明胶海绵于术后2周完全降解。温敏性壳聚糖组肝小叶结构完整，肝细胞结构基本正常，肿胀轻，炎症细胞浸润程度轻，电镜显示整个肝细胞外形结构清楚，细胞核无破损，细胞器良好；肌肉纤维结构完整，炎症细胞浸润程度轻，电镜显示肌纤维走向整齐，肌细胞核形态正常，细胞器良好。可见温敏性壳聚糖止血膜具有较好的止血作用和组织相容性。 -
温敏性壳聚糖止血膜止血作用的实验研究
目的 探讨温敏性壳聚糖止血膜的止血作用. 方法 取成年SD大鼠50只,雌雄不限,体重190～210 g,根据使用止血材料不同随机分为5组(n=10).取各组大鼠制备肝创面出血模型后,分别采用相同大小(2.0 cm×1.0 cm×0.5 cm)的温敏性壳聚糖止血膜(A组)、壳聚糖止血膜(B组)、纤维素止血棉(C组)、明胶海绵(D组)覆盖切口,E组不作处理作为空白对照.大体观察各组出血情况,记录出血时间及出血量,并于4周后取各组肝脏愈合创面组织进行HE染色观察. 结果 大体观察A、B、C组止血效果较好、创面止血较快,D组止血效果较差、出血时间长,E组创面不能止血.A、B、C、D组止血时间和出血量均显著少于E组,A、B、C组均显著少于D组,差异有统计学意义(P＜0.05);A、B、C组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).组织学观察示,与其余各组比较,A组肝细胞水肿较轻,轻度气球样变. 结论 温敏性壳聚糖止血膜对大鼠肝出血创面具有较好的止血作用.
