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上皮细胞激酶-2与层黏连蛋白5-γ-2在食管鳞癌细胞株TE13中相关性的研究
目的 探讨上皮细胞激酶与层黏连蛋白laminin 5-γ-2 在食管鳞癌细胞株TE13 中表达相关性.方法 采用细胞免疫组化法检测EphA2 与laminin 5-γ-2 在食管鳞状细胞癌细胞株TE13 中的表达相关性;采用RT-PCR 方法检测EphA2 与LN5-γ-2 mRNA 表达的关系;采用Western Blot 法检测食管鳞状细胞癌细胞株TE13 中经RNA 干扰技术特异性沉默EphA2 后LN5-γ-2 蛋白表达的变化.结果 细胞免疫组化结果显示LN5-γ-2 蛋白在细胞胞浆表达,且沉默EphA2 后,LN5-γ-2 表达减少.RT-PCR 及Western Blot 实验结果显示在食管鳞状细胞癌细胞株TE13 中,LN5-γ-2mRNA 及蛋白均随EphA2 的沉默而受抑制(P < 0.05).结论 LN5-γ-2 表达受EphA2 的调控,可能为EphA2 的靶基因.EphA2 可能通过调控laminin5-γ-2 对食管鳞癌肿瘤血管生成拟态进行调节.
关键词： 食管鳞癌 上皮细胞激酶 层黏连蛋白5-γ-2 -
膀胱移行细胞癌中EphA2的表达和肿瘤MVD计数的关系
目的:探讨膀胱移行细胞癌中EphA2的生物学意义以及EphA2与微血管密度(MVD)的关系.方法:应用免疫组织化学技术检测85例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱粘膜中EphA2的表达,采用CD31染色标记微血管,行肿瘤微血管密度计数.结果:膀胱移行细胞癌和正常膀胱粘膜EphA2表达阳性率分别为89.4%(76/85)、40%(4/10),两组间差异有统计学意义(P＜0.01);EphA2表达程度与膀胱癌的病理分级、临床分期和淋巴结转移均有相关性(P＜0.05);膀胱移行细胞癌EphA2阴性组与EphA2阳性组间肿瘤微血管密度(MVD)计数差异有统计学意义(P＜0.05),EphA2不同阳性程度组之间MVD计数差异没有统计学意义(P＞0.05).结论:EphA2可作为判定膀胱癌恶性程度的参考指标,与肿瘤微血管生成相关,有望成为膀胱癌治疗的新靶向.
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HIF-1α、EphA2表达对食管鳞癌细胞体外三维培养的影响
目的:探讨肿瘤细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、上皮细胞激酶(EphA2)对食管鳞癌血管生成拟态(vasculogenicmimicry,VM)的影响及两者之间的关系.方法:HIF-1α、EphA2干扰质粒分别转染食管癌Eca109细胞和TE13细胞;RT-PCR、Western blot分别检测转染细胞中HIF-1α、EphA2的抑制效率;体外三维培养模拟血管生成拟态模型观察HIF-1α、EphA2抑制后细胞管状结构数量变化.结果:HIF-1α表达抑制伴随有EphA2表达下调,而EphA2表达抑制对HIF-1α表达无明显影响.HIF-1α、EphA2 miRNA干扰质粒能有效抑制Eca109和TE13中HIF-1α、EphA2的mRNA表达,无论HIF-1α或EphA2表达抑制,均能导致三维培养中管状结构数量下降.但HIF-1α抑制对管状结构的影响要强于EphA2.结论:HIF-1α、EphA2与食管癌血管生成拟态密切相关.EphA2表达调控可能是HIF-1α参与肿瘤细胞VM的形成机制之一,此外还可能存在其他调控途径.
关键词： 食管鳞癌 肿瘤细胞缺氧诱导因子1α 上皮细胞激酶 血管生成拟态 RNA干扰 -
脑膜瘤组织中相关分子标志物表达与预后的关系
为探讨脑膜瘤相关分子标志物(EphA2、VE-cadherin、PN)表达及其与脑膜瘤组织的病理级别、患者预后的关系,检测78例脑膜瘤患者病理组织及21例正常脑组织中EphA2、VE-cadherin、PN表达及蛋白相对表达量.分析其表达的相关性及与脑膜瘤组织病理级别、患者预后的关系.结果显示,脑膜瘤组织中EphA2、VE-cad-herin、PN阳性表达率均高于正常脑组织,且与脑膜瘤病理分级呈正相关.脑膜瘤组织中EphA2、VE-cadherin、PN表达任意两者之间均呈正相关.脑膜瘤组织中EphA2、VE-cadherin、PN不同表达程度的患者5年复发率存在差异.结果提示,脑膜瘤相关分子标志物EphA2、VE-cadherin、PN在脑膜瘤患者中表达率均较高,且与脑膜瘤患者预后存在关联.
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膀胱移行细胞癌中血管生成拟态与Epha2表达的关系
目的 寻找在膀胱癌中是否存在血管生成拟态(VM),探讨VM与上皮细胞激酶(Epha2)表达的相关性.方法 应用免疫组织化学技术检测85例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱黏膜中Epha2的表达,采用过碘酸雪夫氏反应(PAS)和CD31双重染色,寻找血管生成拟态,分析Epha2与VM的关系.结果膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜Epha2表达阳性率分别为89.4%(76/85)和40%(4/10),两组间比较差异有显著性(P<0.01),在85例膀胱癌组织中8例存在血管生成拟态,这些管道呈现PAS阳性、CD31阴性,Epha2表达均呈阳性.结论中低分化膀胱癌中存在血管生成拟态,Epha2与血管生成拟态相关.
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Epha2与血管生成拟态在原发性肝癌中表达关系的研究
目的:探讨原发性肝癌(Primary liver cancer,PLC)中血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)与上皮细胞激酶(epithelial cell kinase,Epha2)的关系,探讨VM的形成机制.方法:161例临床病理资料完整的PLC术后蜡块标本, CD31-PAS双重染色观察VM的表达;免疫组化观察Epha2的表达.结果:PLC中VM阳性率为37.9％(61/161),显著高于对照组(0/15);VM表达与PLC的临床分期、肿瘤大小及肝细胞癌Edmondson分级呈正相关(P＜ 0.05);VM阳性组和阴性组Epha2表达差异有统计学意义(x2=8.490,P=0.037).结论:1、PLC中存在VM表达,临床分期越晚、肿瘤体积越大、细胞分化程度越低形成VM的能力越强;2、Epha2的表达能促进VM形成.
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魟鱼软骨多糖对小鼠黑色素瘤上皮细胞激酶表达的影响
目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠黑色素瘤中上皮细胞激酶(EphA2)表达的影响.方法:将培养的黑色素瘤细胞接种于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,复制小鼠黑色素瘤模型.实验分为模型(等容生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60 mg/kg)与RCG高、中、低剂量(700、300、100 mg/kg)组,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率；采用Western blot法检测EphA2蛋白的表达,采用RT-PCR法检测EphA2基因的表达.结果:与模型组比较,RCG高、中、低剂量组小鼠瘤质量显著减轻,抑瘤率显著升高(P＜ 0.01)；EphA2蛋白表达显著减弱(P＜0.01),EphA2基因表达显著减弱(P＜0.01).结论:RCG抑制小鼠黑色素瘤的生长可能与其减少肿瘤中EphA2表达有关.
