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血管外膜慢性损伤通过CNP影响大鼠颈动脉舒缩功能的实验研究
目的:探讨血管外膜慢性损伤对动脉血管舒缩反应性影响的可能机制。方法以硅胶管为实验研究工具,将大鼠颈动脉进行包裹,构建血管外膜慢性损伤介导早期动脉硬化动物模型以及血管收缩性增强动物模型,详细观察正常组与模型组血管组织中,CNP、cGMP、PKGⅠα和PKGⅠβ这四项指标之间的表达变化。结果就包管侧右颈动脉血管组织来讲,在CNP、cGMP、PKGⅠα表达上,模型组较正常组双侧颈动脉明显减少,有显著的统计学差异(P<0.01);对于模型组中的包管侧右颈动脉血管组织而言,其中PKGⅠβ这项表达与其他组比较呈下降趋势,但是组间对比差异无显著统计学意义(P=0.254)。结论血管外膜慢性损伤早期阶段可以引起血管慢性痉挛,血流量下降,血管对5-HT的反应敏感性增加,局部血管组织中CNP的蛋白表达下调是血管外膜慢性损伤引起血管收缩反应性增强的重要机制之一,并且CNP的降低血管收缩反应性的作用同局部血管组织中PKGⅠα的表达密切相关,同局部血管组织中PKGⅠβ的表达关系不密切。
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人C-型利钠肽-血清白蛋白融合蛋白质的构建及在毕赤酵母中的分泌表达
目的 构建重组表达人C-型利尿钠肽(CNP)-人血清白蛋白(HAS)融合蛋白质的毕赤酵母.方法 重叠PCR拼接CNP(400 bp)-HAS(1 800 bp)成融合基因,双酶切后克隆至表达载体pPIC9K中.电穿孔法转染毕赤酵母菌KM71,摇瓶培养分泌表达.结果 融合基因约为2 200 bp,序列测定正确.SDS-PAGE分析相对分子质量约为80 000,Western blot和RIA鉴定显示其为CNP与HAS的杂合分子.结论 实现了HAS-CNP融合蛋白质在毕赤酵母中的分泌表达.