首页 > 文献资料
-
2-DG对雄激素非依赖型前列腺癌细胞多西紫杉醇化疗敏感性的作用
目的 探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)对多西紫杉醇(Doc)诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3和DU145细胞凋亡的增敏作用及其可能的机制.方法 采用MTT法检测Doc与2-DG单用或合用对细胞增殖的抑制作用,计算q值反映联合用药效果；流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率；ATP检测试剂盒检测细胞内ATP含量的变化；免疫印迹Western印迹技术检测泛素蛋白酶体系统(UPS)功能的内源性蛋白ubiquitinated protein(Ub)、hsp70的表达.结果 2-DG能抑制PC3及DU145细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,但诱导凋亡作用不明显；Doc 0.1、0.5、2.5 nmol/L对PC3细胞及DU145细胞作用48 h的增殖抑制率分别为10.71％、25.32％、56.46％及12.28％、23.94％、63.43％.联用2-DG 1.0 g/L后增殖抑制率为:27.15％、58.74％、87.95％及29.53％、59.41％、90.48％,Doc与2-DG联用后可明显增加其抑制率,两药有协同作用(q值均＞1.15)；Doc 0.5 nmol/L与2-DG 1.0 g/L联合作用PC3细胞及DU145细胞48 h的凋亡率为:46.49％及53.64％,明显高于Doc 0.5 nmol/L单独作用的凋亡率:21.30％及18.92％(均P＜0.05)；2-DG 1.0 g/L分别作用PC3和DU145细胞0、12、24、48、72 h后,ATP检测试剂盒测ATP相对浓度为13.75、11.23、10.19、9.81、9.02和15.00、12.59、11.38、10.54、10.37;同时Western印迹检测发现Ub及Hsp70蛋白出现聚集.结论 2-DG可增强雄激素非依赖型前列腺癌细胞对Doc化疗的敏感性；其机制可能与下调细胞内ATP浓度导致蛋白酶体功能抑制有关.
关键词： 2-脱氧-D-葡萄糖 多西紫杉醇 雄激素非依赖型前列腺癌 ATP 蛋白酶体 -
香芹酚对雄激素非依赖型前列腺癌DU145细胞株的凋亡诱导作用及其分子机制
目的:探讨香芹酚(carvacrol,CV)对雄激素非依赖型前列腺癌DU145细胞株的抗增殖、诱导凋亡作用及相关分子机制.方法:采用不同浓度的CV(0、10、20、40、80、100 μmol/L)体外处理DU145细胞24 h或48 h;采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度CV对DU145细胞增殖的抑制率;采用Hoechst染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)检测凋亡相关基因及蛋白表达水平.结果:CV对前列腺癌DU145细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量及时间依赖性;Hoechst染色法及Annexin V-FITC/PI双染法检测结果显示,不同浓度香芹酚处理DU145后,细胞凋亡程度及比率均明显增加;RT-PCR及Western blotting检测结果显示,随着CV浓度的增加,DU145细胞中Bcl-2表达水平降低,而Bax及Caspase3表达水平升高,细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)在细胞质中的释放增加(P＜0.05).结论:CV能够抑制DU145细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制与调控Bcl2家族蛋白和Caspase3的表达以及Cyt C的释放等有关,CV在雄激素非依赖型前列腺癌的治疗中具有潜在的应用价值.
关键词： 香芹酚 雄激素非依赖型前列腺癌 凋亡
