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自体脂肪基质血管成分对高血压大鼠阴茎勃起功能障碍的影响
目的 探讨自体脂肪基质血管成分(SVF)阴茎海绵体注射对大鼠高血压性勃起功能障碍(ED)的影响及其可能机制.方法 选择30周龄健康雄性自发性高血压大鼠(SHR)40只,同系正常血压大鼠(WKY) 20只,采用无创血压仪测量大鼠尾部收缩压,颈部皮下注射阿扑吗啡(APO)检验大鼠阴茎勃起功能.将有ED的SHR大鼠分为2组:ED-SHR-SVF组(自体SVF阴茎海绵体注射治疗的高血压性ED大鼠,8只)和ED-SHR-磷酸盐缓冲液(PBS)组(PBS阴茎海绵体注射治疗的高血压性ED大鼠,8只).测定各组大鼠阴茎海绵体内压(ICP),采用Western印迹和RT-PCR法检测阴茎海绵体组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白和mRNA表达.结果 SHR大鼠尾部收缩压高于WKY大鼠[(197.47±6.82)比(125.23 ±4.65) mmHg,P＜0.05].SHR大鼠阴茎勃起率为60％(24/40),WKY大鼠为100％ (20/20).5V电刺激后ED-SHR-SVF组ICP明显高于ED-SHR-PBS组[(83.42±3.21)比(52.37 ±3.11) mmHg,P＜0.05];ED-SHR-SVF组eNOS蛋白和mRNA表达明显高于ED-SHR-PBS组(0.43±0.03比0.18 ±0.05、0.92±0.05比0.41 ±0.06,均P＜0.05).结论 高血压可导致大鼠ED,自体SVF可改善高血压性ED大鼠阴茎勃起功能,其机制可能与大鼠阴茎海绵体eNOS表达上调相关.
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基质血管成分辅助脂肪移植的研究进展
自体脂肪移植是美容和整形外科的重要技术之一,可用于先天性或后天性软组织凹陷的修复、乳房再造、瘢痕修复等,但是其始终面临着高吸收率、低成活率的问题.基质血管成分辅助脂肪移植作为一种新兴的技术,在提高脂肪成活率方面取得了一些成效.笔者通过查阅近年来国内外基质血管成分用于脂肪移植的研究和新动态,分析其提高移植脂肪成活率的效果及机制,为基质血管成分的进一步应用提供指导.
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自体脂肪基质血管成分改善植皮效果的初步临床实验研究
目的：在植皮术中辅以自体基质血管成分（stromal vascular fraction，SVF）进行治疗，观察其植皮效果的改善情况。方法于植皮术同时行脂肪抽吸术，取得患者自体脂肪组织，通过胶原酶消化后提取SVF；植皮区行患者自身对照，实验组植皮区皮下注射SVF（1×105 cells/cm2），对照组注射等量生理盐水；术后1个月、3个月、6个月及12个月随访，观察皮片弹性、色泽、质地及回缩率。结果2014年4月至2015年12月，共18例患者。SVF辅助植皮实验组和对照组均未出现皮片存活不佳、坏死（P>0.05）。随访结果显示：术后6个月和12个月，实验组较对照组色泽更接近取皮区正常皮肤（P<0.05）；术后3个月和6个月，实验组含水量均明显高于对照组（P<0.05）；术后3个月、6个月和12个月，实验组皮片摩擦力均明显低于对照组（P<0.05）；术后3个月、6个月和12个月，实验组皮片弹性优于对照组（P<0.05）；术后1个月和3个月，实验组的皮片回缩率明显低于对照组（P<0.05）。结论 SVF辅助皮片移植可有效改善皮片色泽和质地，明显减少皮片回缩，是一种安全有效的方法。
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人脂肪基质血管成分对肾小管上皮细胞的影响及其机制
目的 观察人脂肪基质血管成分(SVF)对肾小管上皮细胞(HK-2)增殖、迁移和凋亡的影响及其机制.方法 取患者肾周脂肪组织,分离SVF并培养脂肪间充质干细胞(AdMSCs),采用流式细胞术鉴定细胞表型.制备SVF和AdMSCs条件培养基,以无血清DMEM培养基作为阴性对照,分别进行细胞增殖、迁移、刮伤愈合以及凋亡等检测,统计学分析HK-2细胞的增殖、迁移细胞数、刮伤愈合面积以及凋亡细胞比率,采用酶联免疫吸附试验(EHSA)测定肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子-1α(SDF-1 α)的表达.结果 新鲜分离的SVF呈小圆形,第3代AdMSCs呈均一长梭形.流式细胞检测SVF表达CD29、CD34、CD45和CD90阳性率分别为45.3％、29.4％、23.8％和34.9％,AdMSCs表达CD29、CD90和CD34阳性率分别为99.2％、93.5％和3.8％,不表达CD45.SVF组及AdMSCs组HK-2的增殖、迁移和刮伤愈合能力与对照组比较均显著增强,而HK-2的凋亡则显著减轻(P＜0.05).SVF组HK-2的增殖能力显著高于AdMSCs组(P＜0.05),但两组HK-2的迁移、刮伤愈合及凋亡差异无统计学意义(P＞0.05).SVF组HGF、VEGF和SDF-1α的表达量分别为(198.41±12.74)、(1 385.68±321.03)和(374.13±145.11) ng/L,AdMSCs组则分别为(112.77±29.16)、(1005.44±256.87)和(247.71 ±73.21) ng/L,且SVF分泌HGF的量显著高于AdMSCs(P ＜0.05).结论 SVF显著增强肾小管上皮细胞的增殖能力,与AdMSCs比较,在促进迁移和抑制凋亡等特性方面具有相同效果,但SVF具有不需体外培养等优点.
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细胞辅助的自体脂肪移植术治疗先天性乳房发育不良
目的:观察CAL技术治疗先天性乳房发育不良的临床效果.方法:肿胀麻醉下,50ml注射器负压抽吸身体赘积部位的脂肪,生理盐水反复冲洗,静置后过滤除去液体和油状物,700rpm离心3min,弃上清.将其中半量的脂肪颗粒用来抽提富含ADSC的自体SVFs,并与剩余脂肪颗粒充分混合后,注射至乳房后间隙及皮下,每次单侧注射量100 ～ 150ml,间隔3～6个月.结果:采用CAL技术治疗先天性乳房发育不良36例,共72侧乳房.其中7例14侧填充1次,24例48侧填充2次,5例10侧填充3次,均达到理想效果.结论:细胞辅助的自体脂肪移植技术治疗先天性乳房发育不良受术者满意度好,效果理想有效,是一种值得推广的手术方法.
关键词： 细胞辅助的脂肪移植术 基质血管成分 填充 先天性乳房发育不良 -
基质血管成分与体外扩增的脂肪来源干细胞促进移植脂肪成活的对比研究
目的:比较血管基质成分(stromal vascular fraction,SVF)与体外扩增的脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)对移植脂肪成活的促进作用.方法:用手术方法切取家兔腹股沟脂肪,进行ASCs体外分离培养；取第3代ASCs分别进行成脂、成骨诱导实验,CD29和CD31流式鉴定；制备SVF,进行CD29和CD31流式鉴定；脂肪移植裸鼠实验分为3组:SVF、ASCs、和空白对照组(DMEM/F12),每组4只裸鼠,沿背部脊柱两侧对称部位4个移植位点,每组共1 6个注射移植位点,每点0.3ml脂肪颗粒(adipose granule,AG)+ 0.2ml细胞成分；术后4m时取材称重、固定行HE染色观察移植脂肪组织结构,行CD31免疫组化染色观察新生血管及其密度.结果:家兔ASCs体外分离培养成功,为贴壁生长,第3代细胞形态均呈长梭形.成脂诱导实验油红0染色显示形成脂滴,成骨诱导实验茜素红染色显示形成钙化结节.流式鉴定显示SVF:CD29:17.0％,CD31:1.3％;ASCs:CD29:96.2％,CD31:3.8％.SVF、ASCs和空白对照组各组移植脂肪成活量分别为0.2096±0.0024g,0.1798±0.0033g,0.1350±0.0020g,两两比较差异均有统计学意义,P＜ 0.05.HE染色显示SVF组移植脂肪成活较好,组织结构完整,脂滴大小均一,可见脂肪组织中间有丰富的血管存在；ASCs组移植脂肪成活尚可,组织结构尚完整,脂滴大小一般均一,可见脂肪组织中有结缔组织纤维间隔和新生血管形成；空白对照组结缔组织纤维间隔明显增多,脂滴大小不一,有少量较大空泡形成.各组移植脂肪新生血管密度分别32.6±2.1条/mm2,29.3±1.6条/mm2,23.3±1.9条/mm2,两两比较均有统计学意义,P＜ 0.05.结论:新鲜的干细胞成分SVF比体外扩增的ASCs能更好的促进移植脂肪成活.
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自体基质血管成分改善脂肪组织移植效果的实验研究
目的:分析自体脂肪基质血管成分(stromal vascular fraction cells,SVF)对脂肪颗粒(adipose granule,AG)移植的作用.方法:从6只健康新西兰家兔背部肩胛区获取脂肪组织,实验组将自体SVF与自体AG复合,植入家兔耳部皮下,对照为单纯脂肪移植.在术后1、3、6个月,用B超和游标卡尺测量移植脂肪体积;术后6个月取材常规组织学观察.结果:术后1、3、6个月对照组脂肪组织存活率分别为:(64.35±8.36)%、(58.22±2.88)%、(50.61±9.47)%;实验组脂肪组织存活率分别为:(77.42±5.1)%、(67.95±6.09)%、(72.75±4.37)%.两组比较均存在显著性差异(P<0.05).术后6个月组织学观察两组呈正常脂肪组织形态,未见明显差异.结论:自体SVF复合脂肪颗粒能够显著提高移植脂肪组织的成活率,为临床脂肪移植提供实验依据.
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可注射自体脂肪颗粒复合PRF和S VF促进移植脂肪组织再生
目的：探讨PRF和SVF对自体脂肪颗粒移植的作用，并分析这种可注射复合生物材料的移植效果．方法：健康新西兰家兔24只，分为四组：单纯脂肪组织移植组（2 mL AG＋0．2 mL NS）、脂肪颗粒复合富血小板纤维蛋白（2 mL AG＋0．2 mL PRF）组、脂肪颗粒复合基质血管成分（2 mL AG＋0．2 mL SVF）组和脂肪颗粒复合PRF和SVF[2 mL AG＋0．2 mL （SVF＋PRF）]组．术后1、3、6月取材，进行大体观察、组织病理学检测、游标卡尺和B超对移植脂肪组织的体积测量．采用SPSS16．0软件，对四组移植脂肪组织的存活率及吸收率进行方差分析并采用LSD法对不同时间点组间进行比较．结果：24周后各组植入脂肪组织的吸收率分别为 AG ＋NS [（49．4±9．5）％]，AG＋SVF [（27．2±4．4）％]，AG＋PRF [（36．4±8．5）％]和AG＋SVF＋PRF [（17．4±6．2）％]，并有显著差异（P＜0．01）．结论：实验结果表明自体脂肪组织复合PRF和SVF能够促进移植脂肪组织的再生，为临床脂肪组织移植提供一种新的策略．
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自体脂肪源性基质血管成分局部移植对兔耳增生性瘢痕形成的影响及机制
目的 探讨自体脂肪源性基质血管成分(SVF)局部移植对兔耳增生性瘢痕(HS)形成的影响及机制. 方法 取24只新西兰大耳白兔,于每只兔左耳腹侧面造成4个直径为1 cm的全层皮肤缺损创面,制作兔耳HS模型,观察创面上皮化情况及局部组织增生情况,记录创面愈合(完全上皮化)时间和HS形成时间.按随机数字表法将24只兔分为SVF组、单纯DMEM组和单纯HS组,每组8只兔、32个创面.于伤后25 d(创面完全上皮化后),将0.2 mL含有CM-Dil标记的自体SVF的低糖DMEM培养液注射于SVF组兔HS,单纯DMEM组兔HS同前注射等量低糖DMEM培养液,每5天注射1次,共3次;单纯HS组兔HS不予任何处理.伤后40 d,取各组兔耳HS,行苏木素-伊红染色观察组织学形态,行Van Gieson染色观察胶原排列情况,荧光显微镜下观察HS中CM-Dil标记的SVF情况,实时荧光定量反转录PCR法和蛋白质印迹法分别检测HS中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及Samd7的mRNA和蛋白表达情况.对数据行单因素方差分析、Tukey检验. 结果 (1)兔耳创面完全上皮化时间为伤后(20.0 ±2.0)d;伤后25 d,HS形成.伤后40 d,单纯DMEM组及单纯HS组兔耳HS仍保持增生状态,SVF组兔耳HS体积缩小、变平,质地变软,色泽稍变浅.(2)伤后40 d,与单纯DMEM组和单纯HS组比较,SVF组兔耳HS内上皮脚样结构较多,炎性细胞数量较少.SVF组兔耳HS胶原排列相对较规则,胶原之间间隙更大.(3)伤后40 d,SVF组兔耳HS仍可见CM-Dil标记的SVF.(4)伤后40 d,与单纯DMEM组和单纯HS组比较,SVF组兔耳HS中TGF-β1和Smad3的mRNA表达量明显下调(P＜0.05),Smad7的mRNA表达量明显上调(P＜0.05);单纯DMEM组与单纯HS组兔耳HS中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表达量无明显差异(P＞0.05).(5)伤后40 d,与单纯DMEM组(0.74±0.03、0.73±0.10、0.54±0.09)和单纯HS组(0.72±0.08、0.71±0.12、0.53±0.06)比较,SVF组兔耳HS中TGF-β1和Smad3的蛋白表达量(0.57±0.06、0.42±0.09)明显下调(P＜0.05),Smad7的蛋白表达量(0.71±0.05)明显上调(P＜0.05);单纯DMEM组与单纯HS组兔耳HS中的TGF-β1、Smad3、Smad7的蛋白表达量无明显差异(P＞0.05). 结论 兔HS形成早期瘢痕内移植自体SVF可抑制HS形成,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路有关.
关键词： 瘢痕 基质血管成分 转化生长因子β/Smad通路
