首页 > 文献资料
-
瘦素诱导乳腺癌细胞中端粒酶反转录酶表达的机制
目的 探讨在乳腺癌细胞(MCF7)中瘦素诱导端粒酶反转录酶(hTERT)表达的分子机制.方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定瘦素对沉默信号转导和转录激活因子3( STAT3)基因后MCF7细胞hTERT mRNA表达水平的影响.采用Western印迹方法测定MCF7细胞经不同处理后hTERT蛋白的表达变化.采用染色质免疫共沉淀(CHIP)技术观察STAT3与hTERT启动子的结合情况.应用双荧光素酶分析,探讨瘦素及P-STAT3抑制剂(AG490)对hTERT 启动子转录活性的影响.结果 STAT3小干扰片段RNA( siRNA)转染细胞后,瘦素诱导的hTERT mRNA的表达减少.Western印迹结果示hTERT蛋白在瘦素处理组及AG490联合瘦素处理组的蛋白表达分别为3.109±0.051、1.025±0.031,加入P-STAT3抑制剂AG490后,瘦素诱导hTERT蛋白表达明显减少(P＜0.01).ChIP结果显示对照组与瘦素处理组mRNA分别为1、3.311±0.017,瘦素(160 ng/ml)作用MCF7细胞后,增加了STAT3与hTERT启动子之间的结合(P＜0.01).双荧光素酶分析结果示,经瘦素( 160 ng/ml)作用后,hTERT启动子活性的变化倍率为80.98±0.18,对照组为20.76±0.31,加入AG490后,hTERT启动子活性的变化倍率为18.65±0.32,瘦素诱导的hTERT启动子的活性明显下降.结论 在乳腺癌MCF7细胞中,瘦素/STAT3信号通路是上调hTERT表达的可能机制.
-
脂多糖、TNFα、IL-6、地塞米松和胰岛素对人乳腺癌MCF7细胞GPR54表达的影响
目的:GPR54是下丘脑神经元调控下丘脑-垂体-性腺轴功能的门控,本文研究不同浓度脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL-6)、地塞米松和胰岛素对人乳腺癌MCF7细胞GPR54 mRNA及蛋白表达的影响. 方法:培养MCF7细胞,用LPS(10 μg/ml和20 μg/ml)、TNFα(20 ng/ml和100 ng/ml)、IL-6(10 ng/ml和20 ng/ml)、地塞米松(10-6 mol/L和10-7 mol/L)和胰岛素(0.01 IU/L和0.1 IU/L)干预72 h,评价干预6、24、48、72 h后GPR54 mRNA(实时荧光定量PCR)和蛋白表达量(Western印迹)的变化. 结果:和对照组相比,LPS(10 μg/ml和20 μg/ml)、TNFα(20 ng/ml和100 ng/ml)、IL-6(10 ng/ml和20 ng/ml)、地塞米松(10-6mol/L和10-7 mol/L)和胰岛素(0.01 IU/L和0.11U/L)均显著增加GPR54 mRNA(P均＜0.05)和蛋白表达. 结论:LPS、TNFα、IL-6、地塞米松和胰岛素显著增加MCF7细胞GPR54的表达,提示这些炎症因子和激素可能通过调节GPR54水平变化进而影响性腺轴功能.
-
小檗胺下调MCF7及MCF7/ADR细胞Suivivin表达
目的探讨钙调蛋白拮抗剂小檗胺(BBM)下调抗凋亡基因Survivin表达的可能性.方法采用人乳腺癌细胞MCF7及其耐阿霉素(ADR)MCF7/ADR细胞与不同浓度BBM培养72h后,采用半定量RT-PCR法检测Survivin mRNA表达.结果 20μmol/L BBM使MCF7和MCF7/ADR细胞Survivin mRNA表达分别由0.43±0.02下降至0.21±0.04和0.57±0.05下降至0.45±0.04(P值均＜0.01).结论 BBM可下调MCF7和MCF7/ADR细胞Survivin mRNA表达.
关键词： 小檗胺 MCF7细胞系 MCF7/ADR细胞系 Survivin基因
