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金针菇多糖的提取及应用
本文简要总结了金针菇多糖的多种提取工艺及其应用,终采用酶解法结合热水浸提法提取金针菇多糖,提取率可达4.89%,将所得产物与蜂蜜、白砂糖、柠檬酸结合,可以制成风味独特的饮料.
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金针菇多糖对环磷酰胺的增效减毒作用
目的:观察金针菇多糖(FVP1)对化疗药环磷酰胺的增效减毒作用.方法:①NIH小鼠右腋皮下接种0.2 mL的1×107·mL-1的S180肉瘤后,随机分为3组:模型对照组腹注生理盐水;环磷酰胺组在第1,3天腹注30 mg·kg-1体重的环磷酰胺,其余时间用生理盐水;FVP1合并环磷酰胺组在第1,3天腹注30 mg·kg-1体重的环磷酰胺,同时每天腹注10 mg·kg-1的FVP1,连续10 d.剥取肿瘤称重,计算抑瘤率.②小鼠腹注100 mg·kg-1环磷酰胺,连续2 d建立免疫抑制小鼠模型,随机分成4组:环磷酰胺组腹注生理盐水;FVP1小、中、大剂量组分别腹注5,10,20 mg·kg-1的 FVP1,连续7 d;另设不用环磷酰胺造模的作为空白对照组.实验结束后检测各组小鼠的外周白细胞、胸腺指数、脾指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾淋巴细胞转化和NK细胞活性.结果:①FVP1与小剂量环磷酰胺伍用能明显提高环磷酰胺对小鼠 S180的抑瘤率.②5,10,20 mg·kg-1的 FVP1均能明显对抗环磷酰胺所致的小鼠白细胞减少和免疫器官萎缩,拮抗环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的降低,恢复免疫受抑小鼠的淋转功能以及NK细胞杀伤活性.结论:FVP1对环磷酰胺具有一定的增效减毒作用.
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金针菇多糖对小鼠抗肿瘤及抗白血病效应的实验研究
目的研究金针菇多糖(FVP)对荷瘤小鼠的抑瘤率和对白血病小鼠生存期的影响,并探讨其抗肿瘤机理.方法以小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)瘤株及小鼠网状细胞白血病(L615)瘤株造模,设空白对照、正常对照、给药(高、低剂量)4组,分别考察金针菇多糖对各组小鼠抑瘤率和生存期的影响.结果金针菇多糖对S180、H22小鼠的抑瘤率分别为50.69%、41.46%以上;对L615白血病小鼠生命延长率达到53.24%以上.结论金针菇多糖是抗肿瘤、抗白血病的有效物质,可干扰肿瘤细胞的有丝分裂过程和提高机体免疫力.
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金针菇多糖对衰老小鼠大脑抗氧化能力的影响
目的:研究金针菇多糖( FVP)对衰老小鼠大脑抗氧化能力的影响。方法 ICR小鼠60只,雌雄各半,按体重随机分为6组:空白对照组,模型组,脑复康组,FVP低、中、高剂量组,实验动物喂饲6 w,处死小鼠,计算小鼠脏器指数;测量大脑抗氧化指标丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px);HE染色观察海马组织形态学改变。结果与模型组比较,FVP组脑指数显著上升(P<0.05),脾脏、肝脏指数显著下降(P<0.05); MDA含量显著下降(P<0.05),GSH-Px和SOD活性显著上升(P<0.05); FVP组显著改善海马神经元的变性、脱落。结论 FVP可使衰老小鼠大脑产生抗氧化作用,可能是其抗衰老的作用机制之一。
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3种真菌多糖对嗜酸乳杆菌发酵特性的影响
目的:研究姬松茸多糖、金针菇多糖和香菇多糖对嗜酸乳杆菌发酵特性的影响,对其能否作为新型益生元进行评价,筛选出3种真菌多糖作为益生元的优添加浓度.方法:以嗜酸乳杆菌发酵乳作为研究对象,分别加入不同浓度的碳源.其中,实验组加入姬松茸多糖(浓度分别为0.2%、0.4%、0.6%、0.8%及1.0%),金针菇多糖(浓度分别为0.2%、0.4%、0.6%、0.8%及1.0%)和香菇多糖(浓度分别为0.4%、0.6%、0.8%、1.0%及1.2%),阳性对照组加入传统益生元菊粉(浓度分别为1%、2%、3%、4%及5%),检测各组发酵乳样品的微生物指标、黏度和pH值,并与阴性对照组(未添加任何碳源)进行对比.结果:在微生物指标的测定实验中,当姬松茸多糖及金针菇多糖浓度为0.6%、香菇多糖浓度为0.8%时,各组样品中嗜酸乳杆菌活菌数大,菌落数的对数值分别可达10.34、9.75和9.95 logcfu·mL-1.各实验组样品的菌落数均高于阴性对照组.在黏度的测定实验中,当姬松茸多糖和香菇多糖浓度为0.8%、金针菇多糖浓度为0.6%时,各组发酵乳样品的黏度大,分别为3 800、3 300和2 800 mPa.s,各实验组样品的黏度均大于阴性对照组.在pH的测定实验中,当姬松茸多糖及金针菇多糖浓度为0.6%、香菇多糖浓度为0.8%时,各组发酵乳样品的pH值低,分别降至4.74、5.12和5.08,各实验组样品的pH值均低于阴性对照组.结论:姬松茸多糖、金针菇多糖以及香菇多糖均能够影响嗜酸乳杆菌的发酵特性,符合作为益生元的标准,姬松茸多糖为本实验样品中优的益生元.
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金针菇多糖对小鼠血清溶血素产生及抗体形成细胞的影响
目的:探讨从金针菇多糖(FVP)中分离的成分FVP 1对小鼠体液免疫的影响.方法:正常小鼠及接种S180的荷瘤小鼠,分别设FVP 1的不同剂量组(5mg/kg/d、10mg/kg/d、20mg/kg/d)和空白对照组,腹腔注射给药后连续6天;第一次给药后3h腹腔注射SRBC进行免疫,末次给药后2h,摘眼球取血和脾脏,进行小鼠血清溶血素抗体测定及脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度试验(QHS).结果:荷瘤小鼠的溶血素生成明显低于正常小鼠,QHS反应也较正常小鼠明显受抑.FVP 1可不同程度地促进正常和荷瘤小鼠的溶血素生成及QHS反应.结论:荷瘤小鼠存在着体液免疫功能的下降,FVP 1体内给药对机体的体液免疫功能有一定的增强作用.
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富锗金针菇多糖肝保护有效成分的研究
目的 寻找富锗金针菇粗多糖(CFVP)中发挥肝保护作用的有效成分.方法 采用0.2% CCl4腹腔注射造成小鼠急性肝损伤模型,以富锗金针菇精品多糖FVP1、FVP2静脉给药,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活力,肝组织匀浆,测定匀浆液中丙二醛(MDA)含量;采用二步分离法制备小鼠原代肝细胞.检测FVP2对原代小鼠肝细胞活力的影响,对CCl4,损伤的原代肝细胞ALT活力的影响.结果 FVP2中、高剂量组血清AST活力值,肝匀浆液MDA值,高剂量组血清ALT活力较模型组有显著性差异(P<0.05);FVP2能显著增加小鼠原代肝细胞的活力(P<0.01);可使原代肝细胞培养液中的ALT活性明显低于模型组(P<0.01).结论 FVP2可能是CFVP肝保护作用的主要有效成分.
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阳离子化金针菇多糖的制备及其在大鼠胚胎成纤维细胞中的基因转染效率评价
目的: 以乙二胺对金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharide,FVP)进行阳离子化修饰,构建新型非病毒基因载体,考察其与SOX2质粒(pSOX2)的结合能力,评价其在大鼠胚胎成纤维(rat embryonic fibroblast,REF)细胞中的转染效率.方法: 依次采用水提醇沉、纤维素柱和凝胶柱等方法分离、纯化FVP,然后,以N,N-羰基二咪唑为连接剂,通过化学修饰的方法将乙二胺键合到FVP骨架,制备得到乙二胺修饰的FVP(FVP-乙二胺).用红外、核磁、元素分析和Zeta电位测定等方法对FVP-乙二胺进行表征;用凝胶电泳阻滞实验考察FVP-乙二胺与pSOX2的结合能力;用动态光散射和Zeta电位仪测定FVP-乙二胺/pSOX2纳米粒的粒径和Zeta电位,并经透射电镜(TEM)观察纳米粒的形态.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察纳米粒对REF细胞的毒性,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)评价纳米粒对REF细胞的转染效率.结果: 成功制备得到FVP-乙二胺;凝胶电泳结果显示,FVP-乙二胺与pSOX2的质量比为10∶1时,能完全将质粒滞留于原孔;质量比为20∶1时,FVP-乙二胺/pSOX2纳米粒粒径小,呈分布均匀、大小均一的类球型.与阳性对照支化聚乙烯亚胺(PEI)/pSOX2和脂质体2000相比,FVP-乙二胺/pSOX2纳米粒对REF细胞的毒性明显降低,而转染效率显著提高.结论: 天然来源的FVP,加以适当的阳离子化修饰,可以被开发成一种安全、经济、高效的非病毒基因载体,为基因治疗和组织工程的基础研究奠定实验基础.
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金针菇多糖免疫活性的研究
目的探讨从金针菇多糖(FVP)中分离的成分FVP1的免疫活性,观察其对小鼠免疫器官、外周血白细胞及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.方法正常小鼠及接种S180的荷瘤小鼠,分别随机分为不同剂量的给药组和空白对照组,给药组分别腹注给药5mg/(Kg@d)、10mg/(Kg@d)、20mg/(Kg@d)的FVP1,空白对照组腹腔注射等容量的生理盐水,连续7d后,尾静脉取血,计数白细胞及淋巴细胞;取胸腺、脾脏称重,计算胸腺(脾)指数;采用中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力.结果 FVP1对正常小鼠胸腺指数有降低趋势,能明显提高正常小鼠脾指数;对正常小鼠外周血白细胞无明显影响,但时荷瘤小鼠则有明显的升高白细胞的作用,还能明显提高正常小鼠和荷瘤小鼠外周血淋巴细胞数;能明显提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.结论:FVP1体内给药能促进机体的免疫功能,从而发挥其肿瘤免疫调节作用.
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金菌灵胶囊在HBV DNA低水平复制慢性乙型肝炎的应用
目的 观察金菌灵胶囊对HBV DNA低水平复制的HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)的治疗效果.方法 治疗组92例患者中有43例HBeAg阳性和49例HBeAg阴性,均给予金菌灵胶囊治疗.对照组110例,其中 49例HBeAg阳性和61例HBeAg阴性,给予口服水飞蓟素等基础护肝药, 疗程两组均为12周.两组患者在治疗前和治疗12周时均进行HBVM、HBV DNA定量和肝功能检测.结果 治疗组肝功能恢复更显著( P <0.01),治疗组12周时有44例HBV DNA转阴,其中HBeAg阳性患者中有18例出现HBeAg阴转或转换,16例HBV DNA转阴;对照组中只有16例HBV DNA转阴,其中HBeAg阳性患者中只有6例出现HBeAg阴转或转换,7例HBV DNA转阴( P <0.01);治疗组中HBeAg阴性患者HBV DNA转阴率显著多于HBeAg阳性者( P <0.01).结论 金菌灵胶囊对HBV DNA低水平复制的CHB有显著的抗病毒和护肝作用.