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一种新型多重PCR技术在肿瘤研究中的应用
多重基因表达遗传分析系统(GenomeLab gene expression profiler genetic analysis system,GeXP)是一种全新的基因表达谱定量分析平台.它能够在同一反应中对多至35个基因进行定量检测和分析,并将通用引物与特异引物相结合.它采用荧光毛细电泳分离技术对多重PCR产物进行定量检测和分析.本文重点综述了多重基因表达遗传分析系统的技术原理及其在肿瘤研究中的应用.
关键词: 多重基因表达遗传分析系统 多重基因表达 肿瘤标志物 -
7种假丝酵母菌耐药相关基因GeXP检测方法的建立
目的:利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,建立一种可同时检测7种假丝酵母菌耐药相关基因RNA表达水平的方法.方法:设计7种(MDR1、FlU1、CDR1、CDR2、ADH1、ERG3、ERG11)已知与白假丝酵母耐药相关基因的特异性引物及假丝酵母ITS基因参照引物,优化多重反应体系及反应条件,用热带假丝酵母标准株来验证多重反应体系的特异性,通过比较标准株和临床敏感株,剂量依赖株及耐药株各基因表达峰图,分析不同菌株各基因表达差异.结果:经过优化反应条件,可同时扩增出假丝酵母耐药相关的7种基因特异片段,耐药株和剂量依赖株的ERG11、CDR2、CDR1、MDR1和ERG3基因的相对表达量与敏感株相比均有不同程度的增高.结论:建立了多重基因表达检测体系,GeXP多重基因表达检测方法具有高通量、特异性强、灵敏度高和快速等优点.