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β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的研究
β-半乳糖苷酶的研究进展 β-半乳糖苷酶来源及作用机理.β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)普遍存在于动物(幼小动物的肠中)、植物(杏、苹果等)及微生物(细菌、霉菌等)中,能够将乳糖水解为葡萄糖及半乳糖供生物体代谢使用.在生物体体内,β-半乳糖苷酶是由LacZ 基因编码翻译而成的蛋白质酶类,通过提取动物、植物及微生物中的乳糖酶蛋白,发现来自于不同物种体内的蛋白同源性较高,进而对乳糖酶基因进行深入分类研究,并建立了β-半乳糖苷酶基因库,其中大部分基因均来自于细菌[1].
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还原型谷胱甘肽在急危重症中的应用
谷胱甘肽(Glutathione)是谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成的三肽物质.存在在众多的组织器官中,分为动物型与植物型两种.还原型谷胱甘肽(GSH)是主要的活性状态,大约占95%;氧化型谷肽甘肽(GSSG)是非活性状态,约占1%.内源性谷胱甘肽主要存在于胞浆内,由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶催化合成.GSH含有巯基(-SH)是其发挥主要功能的基团,含γ-谷氨酰胺以维持GSH分子的稳定性,避免被蛋白酶水解.
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酶催化制备(R)-2-氯-1-[(R)-6-氟苯并二氢吡喃-2-基]-1-乙醇
采用基因重组大肠杆菌表达(R)-羰基还原酶,通过优化诱导温度、碳源类型和补料速度,初步确定佳产酶条件:诱导温度为28℃,碳源类型为葡萄糖,佳补料速度为20 ml/h,产酶活力提高至63.1 U/g.利用葡萄糖脱氢酶耦合(R)-羰基还原酶催化制备奈必洛尔关键中间体(R)-2-氯-1-[(R)-6-氟苯并二氢吡喃-2-基]-1-乙醇,确定葡萄糖脱氢酶和羰基还原酶的佳投酶量.当底物2-氯-1-[(R)-6-氟苯并二氢吡喃-2-基]-1-乙酮投料量为5 g时,葡萄糖脱氢酶和(R)-羰基还原酶的佳投酶量为1 000U和120U,所制备目标化合物纯度98.3％,收率91％,手性HPLC纯度为99.6％,手性GC纯度为98.5％.
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LM-BP神经网络优化酶催化合成维生素C酯化物条件
目的 评价LM-BP神经网络模型优化酶催化合成维生素C酯化物条件效果.方法 使用Levenberg-Marquardt改进BP算法计算了酶催化合成维生素C乳酸酯实验数据,通过LM-BP ANN模型关联预测酶量、温度、底物浓度、反应时间因素对维生素C乳酸酯产率的影响,并且将计算结果与标准多元回归方法比较.结果 LM-BP ANN模型拟合程度好,预测精度高,优于标准多元回归方法.结论 LM-BP ANN可以为酶催化合成维生素C酯化物条件寻优,可有效改善响应曲面分析方法.此方法也可用于其他酶催化实验条件分析.
