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p,P'-DDE对青春前期大鼠睾丸组织半胱氨酰天冬氨酸酶mRNA表达及活力的影响
目的 研究P,P'-DDE在诱导青春前期SD大鼠睾丸细胞凋亡中半胱氨酰天冬氨酸酶(caspase)的作用.方法 将22日龄清洁级雄性SD大鼠20只随机分为低(20 mg/kg)、中(60 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量p,P'-DDE染毒组和对照组(玉米油),每组5只.采用腹腔注射染毒,注射容积为10ml/kg,隔天染毒1次,共进行10天.染毒结束后,处死大鼠,分离睾丸、肝、肾、脾、肺器官,称重后计算脏器系数.取睾丸制备组织匀浆,实时荧光定量PCR测定睾丸组织caspase-3、caspase-8、caspase-9mRNA的表达;比色法检测睾丸组织caspase-3、caspase-8、caspase-9的活力.结果 各组大鼠体重和睾丸、肾、脾、肺的脏器系数间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,高剂量p,P'-DDE染毒组大鼠肝脏系数较高.差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较.高剂量P,P'-DDE染毒组大鼠睾丸组织caspase-3、caspase-8、caspase-9和中剂量P,P'-DDE染毒组大鼠睾丸组织caspase-9表达均升高.差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,高剂量P,p'-DDE染毒组大鼠睾丸组织caspase-3、caspase-8、caspase-9活力均较高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p,P'-DDE可能通过启动caspase-8和easpase-9,进而激活下游效应caspase-3的级联反应而诱导睾丸组织细胞凋亡.
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邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对GC-2 spd细胞半胱氨酰天冬氨酸酶蛋白及mRNA表达的影响
目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)染毒对GC-2 spd细胞半胱氨酰天冬氨酸酶(caspase)蛋白及mRNA表达的影响.方法 将体外培养的处于对数生长期的GC-2 spd细胞暴露于含终浓度为0(溶剂对照)、50、100、200 μmol/L DEHP的培养基中培养24 h.采用Real-time PCR法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9 mRNA的表达,采用Western blotting法检测细胞caspase-3蛋白酶原(procaspase-3)、procaspase-8 、procaspase-9的表达.结果 与溶剂对照组比较,100 μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞caspase-3 mRNA的表达水平和200 μmol/LDEHP染毒组GC-2 spd细胞caspase-8 mRNA的表达水平及50、200 μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞caspase-9mRNA的表达水平均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与溶剂对照组比较,100、200 μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞proc aspase-3、 procaspase-8、 procaspase-9的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着DEHP染毒浓度的升高,GC-2 spd细胞procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9的表达水平均呈下降趋势.结论 DEHP体外染毒可能通过启动caspase-8和caspase-9进而激活下游caspase-3级联反应,终诱导生精细胞凋亡.
