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HO-1介导黄芪甲苷抗原代心肌细胞缺氧/复氧损伤作用研究
[目的]研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制.[方法]培养乳鼠原代心肌细胞,以缺氧4 h,复氧4 h建立心肌H/R损伤模型.四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力.检测细胞培养液中心肌肌钙蛋白(cTnT)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,炎症细胞因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.分别以聚合酶链式反应逆转录(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌细胞血红素氧化酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平.[结果]与H/R组比较,AS-Ⅳ、HO-1激动剂原卟啉氯化钴(CoPP)均可显著降低细胞上清中cTnT、LDH含量(P<0.01),降低炎症因子hs-CRP、TNF-α水平(P<0.01),而HO-1拮抗剂原卟啉Ⅸ锌(Ⅱ)络合物(ZnPP)作用趋势则相反.与H/R组比较,CoPP组及AS-Ⅳ组HO-1 mRNA、蛋白表达水平显著升高(P<0.01),ZnPP组则显著下降(P<0.01).[结论]AS-Ⅳ对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有显著的保护作用,其机制与诱导具有保护作用的HO-1表达有关.
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新生大鼠海马脑片OGD模型中HO-1对NGB的影响
目的 观察HO对脑红蛋白(HGB)的影响,探索NGB的调控机制.方法 体外培养新生SD大鼠海马脑片,用HO-1促进剂Hemin和抑制剂Znpp干预后建立OGD模型.用HE、尼氏染色和免疫组化法观察OGD模型中神经元和星形胶质细胞的状态及HO-1和NGB表达的变化.结果 ①加入Hemin后,HE及尼氏染色示,神经元和星形胶质细胞与正常培养的海马脑片比较变化不大,仅有轻微的水肿.免疫组化示,HO-1和NGB的表达均增加.②加入Znpp后,HE及尼氏染色示,神经元和星形胶质细胞结构模糊,存在广泛水肿、变性、坏死.免疫组化示,HO-1和NGB的表达下降.结论 HO-1和NGB呈同步变化,提示两者可能存在相关性.NGB对神经元和星形胶质细胞具有保护作用.
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血红素加氧酶-1在间充质干细胞免疫抑制效应中的作用
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)中血红素加氧酶-1(HO-1)的表达及其对MSCs免疫抑制效应的影响.方法:从人骨髓中分离培养MSCs,流式细胞术检测其纯度.尼龙棉柱法分离外周血T淋巴细胞,用植物血凝素(PHA)刺激后,将其与MSCs共孵育,再加入HO-1特异性抑制剂Znpp, MTT法测定T细胞的增殖并计算增殖转化抑制率.RT-PCR法检测MSCs中HO-1mRNA的表达.结果:人MSCs中有HO-1mRNA的表达,MSCs可使异体T细胞增殖转化受抑,加入Znpp可使MSC对T淋巴细胞免疫抑制效应减弱.结论:HO-1在MSCs对T淋巴细胞的免疫抑制效应中可能发挥重要的作用.
