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actin基因文献资料
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黄独微型块茎诱导形成中SQS基因表达的qRT-PCR分析
目的 对黄独微型块茎鲨烯合酶(SQS)基因的表达量进行分析,旨在为阐明黄独微型块茎不同诱导形成时期皂苷的合成机制提供理论依据.方法 以Actin基因为内参基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析技术.通过对不同诱导形成时期的黄独微型块茎进行取样并提取RNA,反转录获得cDNA作模板,利用sybr Green I成功构建了目的基因SQS和Actin的扩增曲线和熔解曲线.结果 定量结果表明,SQS基因在黄独微型块茎诱导形成的初期(第18～36天).表达量显著增加;在黄独微型块茎诱导形成的中期(第36～72天)SQS基因的表达量显著下降,并趋于稳定;在黄独微型块茎诱导形成的后期(第72～90天)SQS基因的表达量再次显著下降.结论 在黄独微型块茎诱导形成的过程中,SQS基因的表达量呈现出“低-高-低-不变-低”的变化趋势,推测SQS是黄独微型块茎诱导形成中皂苷生物合成的关键酶.
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夏侧金盏花Actin基因片段的克隆及表达分析
目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础.方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息；根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析Actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达.结果:克隆获得一长度为1 009 bp的夏侧金盏花Actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162；半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异.结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因.
