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VEGF转染文献资料
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VEGF165转染大鼠血管内皮细胞对新生血管形成影响的实验研究
目的 探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)共表达载体转染大鼠血管内皮细胞,植入大鼠体内,观察诱导新生血管情况,为移植组织诱导新生血管形成奠定基础.方法 对质粒pIRES2-EGFP/VEGF165进行扩增、纯化,以脂质体法转染大鼠血管内皮细胞并植入肾被膜下.采用荧光显微镜检测增强绿色荧光蛋白在内皮细胞中的表达,用流式细胞仪检测转染效率.用RT-PCR检测VEGFmRNA的表达,免疫组化检测VEGF在内皮细胞中的表达.切取移植肾脏组织标本,HE染色观察组织形态学变化.结果 荧光显微镜观察到实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达,流式细胞仪分析转染效率为13.06%.实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达.RT-PCR显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达.移植后14 d,实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成,而对照组及空白转染组尽管血管内皮细胞仍存活,但未形成明显血窦.结论 转染VEGF是促进内皮细胞早期(14d内)形成新生血管的有效途径.
