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脐带血干细胞增殖能力的研究
目的对新鲜、冷冻后复苏及扩增后的脐带血干细胞增殖能力的研究.方法采集正常分娩产妇自愿捐献的脐带血,用淋巴细胞分离液分选出单个核细胞或用磁珠抗体分选CD34+细胞,冷冻贮存或扩增.用甲基纤维素半固体培养基培养方法测定脐带血冷冻或扩增后的集落形成能力,并与新鲜脐带血做比较.用MTF方法测定扩增的脐带血干细胞与新鲜脐带血干细胞黏附功能.结果新鲜脐带血单个核细胞105个可生成CFU-Mix集落(19.0±2.8)个、CFU-GM(55.6±15.7)个、BFU-E(65.0±22.8)个.冷冻复苏的脐带血单个核细胞105个可生成Mix集落(25.2±8.4)个、CFU-GM(46.5±18.0)个、BFU-E(52.3±24.5)个.在含有PF4(100ng/ml)的扩增后的脐带血,每103个CD34+细胞生成CFU-Mix集落(32.2±6.4)个、CFU-GM(42.5±9.31)个、BFU-E(22.3±2.3)个.PF4促进新鲜脐带血的黏附能力,而且在扩增脐带血CD34+细胞体系中加入100ng/ml的PF4,脐带血CD34+细胞对基质层的黏附能力始终保持较高水平,14天时脐带血CD34+细胞自发黏附率PF4组比对照组提高(55.07±13.62)%.结论冷冻或含PF4优化体系扩增脐带血干细胞保持了新鲜脐带血干细胞形成CFU-Mix的能力;在扩增脐带血干细胞中PF4可保持脐带血CD34+细胞黏附功能.
关键词: 脐带血干细胞 集落形成单位测定 单个核细胞 血小板第四因子(PF4)