首页 > 文献资料
-
促分裂原活化蛋白激酶信号阻断剂在TPO促进UT7细胞增殖和分化中的作用
目的探索促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号阻断剂对巨核细胞生长分化因子(TPO)促进UT7细胞增殖和分化作用,阐明TPO对UT7细胞作用的机制.方法将EGFP pMSCV和MEK 1 pMSCV质粒转染UT7细胞;转染细胞与TPO共培养,Western blot法检测UT7细胞MEK 1(MAPK/Erk kinase 1)磷酸化;观察转染突变(Ser222A)的MEK 1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测转染突变(Ser222A)的MEK 1和MAPK阻断剂PD98059对UT7细胞表达CD41的影响.结果①重组逆转录病毒载体MEK1 pMSCV和EGFPpMSCV转染UT7细胞,EGFP阳性率为60.73%.②TPO不同的作用时间(1 h,3 h),实验组磷酸化MEK1均低于对照组(P值均＜0.05).③MAPK阻断剂PD98059和外源突变MEK基因阻断了TPO对UT7细胞的增殖作用,DMSO对照组的细胞增殖率为98.58%,PD98059组的细胞增殖率为39.00%(P＜0.05);转染EGFP pMSCV组细胞增殖率为102.12%,转染MEK 1 pMSCV组细胞增殖率为48.93%(P＜0.05).④MAPK阻断剂PD98059组UT7细胞CD41表达(10.27%)明显低于对照组(36.43%),转染MEKI pMSCV组UT7细胞CD41表达(24.03%)明显低于转染EGFP pMSCV组(40.16%).结论TPO诱导UT7细胞MEK1磷酸化,TPO作用时间与UT7细胞MEK1的磷酸化有明显的关系,MAPK信号转导通路介导TPO促进UT7细胞增殖和CD41表达.
