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siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞中HOXB7基因的干涉作用研究
目的:观察靶向siRNA抑制恶性黑色素瘤细胞株A375同源盒基因HOXB7表达后,对相应生长因子bFGF表达水平及A375细胞生物学特性的影响.方法:根据HOXB7基因设计3条序列特异性的siRNA(si-HOXB7-1,si-HOXB7-2,si-HOXB7-3),在脂质体Lipofectamine2000的介导下转染A375细胞,采用RT-PCR和FCM法来观察HOXB7及bFGF的基因沉默效应.MTF法检测A375细胞体外增殖活性.结果:3条siRNA均能不同程度地下调A375细胞HOXB7表达水平,第3条序列能更有效地封闭HOXB7基因,而空转组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:靶向HOXB7基因的siRNA可有效沉默HOXB7基因及其调控的基因bFGF的表达,并控制恶性黑色素瘤细胞的生长.
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HOXB7在胃癌组织中的表达及其临床意义
目的:分析同源异型盒基因B7(Homeobox B7,HOXB7)在人胃癌组织中的表达情况,并探讨HOXB7的表达与胃癌患者临床病理特征和预后的关系.方法:收集行手术切除的胃癌组织及对应癌旁组织共120例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术、蛋白印迹(Westem blot)和免疫组化染色分别检测HOXB7mRNA水平及蛋白水平在胃癌及对应癌旁组织中的表达,通过卡方检验分析HOXB7表达水平与胃癌患者临床病理因素间的相关性,采用单因素及多因素Cox回归模型评估HOXB7在胃癌风险评估中的作用,Kaplan-Meier生存曲线分析HOXB7表达水平与胃癌患者无瘤生存期和总生存期的关系.结果:胃癌组织中HOXB7 mRNA和蛋白表达水平均显著高于对应癌旁组织(P＜0.05);HOXB7蛋白表达与肿瘤临床分期、浸润深度及淋巴结转移均具有显著相关性(P＜0.05),而与患者性别、年龄、分化程度及远处转移均无显著相关性(P＞0.05).单因素和多因素Cox分析提示HOXB7可以作为评估胃癌患者预后的独立风险因素.Kaplan-Meier生存分析结果显示高表达HOXB7的胃癌患者无瘤生存时间和总生存时间均显著低于HOXB7低表达患者组(P＜0.01).结论:HOXB7蛋白在胃癌组织中高表达,并与胃癌的恶性表型有关,可能参与胃癌发生及恶性进展过程,可作为判断胃癌患预后的重要参考指标.
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HOXB7调控NKX3-1促进大肠癌转移机制分析
目的 分析HOXB7基因的过表达表达谱数据,探索HOXB7基因在大肠癌发生和转移过程中可能参与的分子机制.方法 通过对HOXB7基因过表达的大肠癌细胞株对比空载对照组中表达具有差异的基因,进行转录因子结合位点富集分析,富集的转录因子结合位点与差异基因取交集,得到表达具有差异的转录因子结合位点,对具有此转录因子结合位点的差异表达基因进行共表达分析,明确这些基因可能具有的共表达特性,并对这些共表达基因对应的蛋白进行蛋白相互作用网络调控分析,明确这些基因可能参与的细胞信号通路.结果 转录因子NKX3-1结合位点在HOXB7过表达的上调差异基因中的转录调控区域富集程度较高,且其本身为上调的差异基因,推测其可能在部分上调基因中具有调控作用.而NKX3-1基因与具有其转录因子结合位点的14个基因存在着共表达关系,且这14个基因所主导的细胞信号子网络主要参与肿瘤相关通路、Wnt信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞间连接、细胞与细胞外基质连接等与肿瘤发生及转移密切相关的信号通路.结论 HOXB7基因可能通过调控NKX3-1基因促进大肠癌的发生和转移.
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HOXB7对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响
目的 研究HOXB7在人非小细胞肺癌组织及细胞系中的表达水平,HOXB7表达水平改变对非小细胞肺癌细胞增殖的影响.方法 通过Real-time PCR、免疫组织化学技术检测人非小细胞肺癌及细胞系中HOXB7的表达水平,根据病理资料初步分析HOXB7与非小细胞肺癌预后的关系.通过转染si-RNA抑制HOXB7的表达水平,并通过定量PCR检测转染效率.利用流式细胞术检测抑制HOXB7对A549细胞增殖能力的影响.结果 相对正常肺组织及细胞,在非小细胞肺癌组织和细胞系中HOXB7的表达出现了显著上调,高表达HOXB7的NSCLC患者整体生存率较差.转染si-RNA能显著抑制HOXB7表达水平和人非小细胞肺癌A549细胞的增殖能力.结论 非小细胞肺癌组织及细胞系中HOXB7的表达显著上调.
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转录因子HOXB7在肿瘤及相关信号通路中的作用
转录因子HOXB7在多种肿瘤组织中高表达,且与肿瘤分期、预后密切相关.研究表明,HOXB7不仅参与调控细胞增殖和凋亡,在肿瘤转移过程中也发挥重要作用.多个信号转导通路可以调控HOXB7的表达与活化,同时HOXB7也可影响通路中多个重要因子,其在肿瘤发生发展中发挥重要作用,可成为肿瘤治疗的潜在靶点.
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同源异型盒基因HOXB7在乳腺癌组织中的表达及其意义
目的:探讨同源异型盒基因B7 (HOXB7)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法:分别应用West-ern blotting和RT-PCR方法检测48例乳腺癌组织、20例乳腺纤维腺瘤组织、20例正常乳腺组织中HOXB7蛋白和HOXB7 mRNA的表达水平,并分析HOXB7 mRNA的表达量与乳腺癌患者年龄、临床分期以及病理分级、淋巴结转移等特征的关系.结果:与乳腺纤维腺瘤组织和正常乳腺组织相比,HOXB7蛋白及HOXB7 mRNA在乳腺癌组织中的表达水平均显著增高(P＜0.05),且HOXB7蛋白及HOXB7 mRNA在乳腺纤维腺瘤组织中的表达水平显著高于正常乳腺组织(P＜0.05).临床分期Ⅲ期组、浸润性乳腺癌病理分级Ⅲ级组的乳腺癌病例中HOXB7mRNA的表达水平均显著高于Ⅰ期组(P＜0.05),淋巴结转移阳性组HOXB7 mRNA的表达明显高于淋巴结转移阴性者(P＜0.05).结论:HOXB7在乳腺癌组织中高表达,且与乳腺癌恶性程度、分期、分级密切相关.
关键词： 乳腺癌 HOXB7 Western blotting RT-PCR -
HOXB7在前列腺癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨前列腺癌中HOXB7的表达及临床意义.方法 采用免疫组化检测32例前列腺癌及癌旁组织中HOXB7的表达,荧光定量PCR、Western blot检测人前列腺癌细胞株pC3、LNCap、DU145及前列腺上皮细胞株RWPE-1中HOXB7mRNA和蛋白的表达.结果 前列腺癌、癌旁组织中HOXB7阳性表达率分别为81.3％、9.4％,差异有统计学意义(P＜0.01);前列腺癌中HOXB7表达与病理分级(r=0.531,P＜0.05)、TNM分期呈正相关(r=0.786,P＜0.05).前列腺癌细胞株中HOXB7 mRNA和蛋白水平明显高于前列腺上皮细胞株(P＜0.05).结论 HOXB7高表达可能参与前列腺癌的发生和发展.
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HOXB7在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨HOXB7基因在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及临床意义.方法:收集32例膀胱尿路上皮癌及正常膀胱组织标本,采用免疫组化方法检测HOXB7在膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱组织中的表达,qPCR、Western Blot检测(J82、Um-uc-3、T24)膀胱细胞系及SV-HUC-1膀胱永生化细胞中HOXB7mRNA和蛋白水平表达.结果:膀胱尿路上皮癌组织HOXB7阳性率为84.37％(27/32),正常膀胱组织阳性表达率为10.4％(3/32),差异具有统计学意义(X2=42.3,P＜0.01).HOXB7在膀胱尿路上皮癌组织的表达强度与病理分级(r=0.673,P＜0.05)、TNM分期呈正相关(r=0.786,P＜0.05),HOXB7在(T24、J82、Um-uc-3)膀胱尿路上皮癌细胞系mRNA和蛋白水平高表达,与SV-HUC-1细胞系表达比较差异具有统计学意义(t=2.752、3.876、3.026,P＜0.05).结论:HOXB7在膀胱尿路上皮癌组织中高表达,参与膀胱肿瘤的发生、发展.
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HOXB7在特发性肺纤维化中抗纤维化的作用
目的 探讨抑制HOXB7对TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞纤维化的影响及可能的相关机制.方法 qRT-PCR检测肺纤维化组织中HOXB7的mRNA表达量;TGF-β1诱导A549纤维化;转染HOXB7 siRNA到A549细胞,抑制HOXB7;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;qRT-PCR检测A549细胞HOXB7、E-cadherin、α-SMA和COL1A1的mRNA表达量;Western blot检测A549细胞HOXB7、E-cadherin、α-SMA、bFGF和COL1A1蛋白表达量.细胞分组:control组(空白对照)、TGF-β1组(TGF-β1诱导)、β1-HOXB7 si组(TGF-β1诱导后转染HOXB7 siRNA)、β1-non-spe组(TGF-β1诱导后转染non-specific siRNA)、β1-HOXB7 si-bFGF组(bFGF处理的β1-HOXB7 si组).结果 肺纤维组织HOXB7的mRNA表达量显著升高;细胞转染实验中HOXB7的mRNA和蛋白表达量均显著降低;降低HOXB7表达量显著抑制A549向细胞纤维化形态改变;抑制HOXB7显著升高E-cadherin mRNA和蛋白表达量,且降低α-SMA和COL1A1的mRNA和蛋白表达量;抑制HOXB7显著降低bFGF的蛋白表达量,且bFGF孵育细胞可有效反转抑制HOXB7对细胞E-cadherin、α-SMA和COL1A1表达量的影响.结论 抑制HOXB7可通过调控bFGF有效降低TGF-β1诱导的肺泡细胞EMT过程,进而抑制其纤维化.
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下调转录因子HOXB7抑制胰腺癌BXPC3细胞侵袭及迁移机制研究
目的:研究在胰腺癌细胞株BXPC3中转染shRNA干扰转录因子HOXB7的表达后,BXPC3细胞侵袭及迁移能力的变化.方法:Real-time PCR及Western blot印迹方法分别检测HOXB7基因mRNA及蛋白在正常人胰腺导管上皮细胞HPDE、胰腺癌细胞株BXPC3中的表达;在胰腺癌细胞株BXPC3细胞中转染HOXB7shRNA及阴性对照shRNA,mRNA及蛋白水平检测转录因子HOXB7的干扰效果;Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力;划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化.结果:Real-time PCR及Western blot结果显示HOXB7基因mRNA及蛋白在BXPC3细胞株中表达明显高于正常人胰腺导管上皮细胞HPDE(P＜0.05).在BXPC3细胞中转染HOXB7 shRNA后HOXB7的mRNA及蛋白表达水平均明显受到抑制;Transwell侵袭实验及划痕实验显示细胞侵袭能力及迁移能力均显著降低.结论:胰腺癌细胞株BXPC3中干扰转录因子HOXB7表达后,细胞侵袭及迁移能力明显降低.
