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莱菔硫烷抗凋亡对H9C2心肌细胞的保护作用
目的 探讨莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)抗凋亡对H9C2心肌细胞冷缺氧/复氧(H/R)后细胞存活的影响.方法 H9C2心肌细胞传代后随机分为六组:Sham组、冷H/R组、SFN5μM组、SFN10μM组、SFN25μM组、SFN100μM组.常规缺氧30min后,冷缺氧10h,然后复氧4h,制作心肌细胞缺氧/复氧模型.冷H/R组:在缺氧前12h给予相同剂量的DMSO;SFN各组:在缺氧前12h给予不同剂量的SFN.采用高倍倒置显微镜观察细胞形态的变化及凋亡程度,CCK8法检测各组H9C2心肌细胞的生存活力,用western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 不同剂量SFN组(5μM组、10μM组、25μM组、100μM组)与对照组相比,心肌细胞生长状态均好于冷H/R组,细胞存活率有不同程度提高(70.49±0.77,76.16±0.38,67.70±0.34,60.08±0.24 vs.54.95±0.54;P＜0.01);5μM组、10μM组、25μM组Bcl-2蛋白表达量不同程度增加,100μM组无差异(1.30±0,1.54±0.01,1.11±0.01vs.0.81±0.01;P＜0.01;0.80±0.01 vs.0.81±0.01;P＞0.05),而Bax蛋白表达(5μM组、10μM组、25μM组、100μM组)则被不同程度抑制(1.31±0.01,0.84±0.01,1.50±0,1.61±0.01 vs.1.77±0;P＜0.05),BCL2/Bax比值(5μM组、10μM组、25μM组、100μM组与R/I组相比)升高(0.99±0.01,1.83±0.01,0.74±0,0.50±0.01 vs.0.46±0;P＜0.05).其中SFN10μM组抗凋亡作用强,细胞存活率佳.结论 SFN可能通过提高抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达,抑制促凋亡蛋白Bax蛋白的表达,Bcl-2与Bax蛋白的比值增加,提高心肌细胞存活率.同时亦发现:SFN抗凋亡作用并不总是随着剂量增大而增强.
