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鸦胆子油乳制剂对宫颈癌 Hela 细胞的抑制效果及作用机制研究
目的:探讨鸦胆子油乳制剂对宫颈癌 Hela 细胞的抑制效果及作用机制。方法观察不同浓度(5,10μg/mL)鸦胆子油乳处理 Hela 细胞后的形态改变;检测不同浓度鸦胆子油乳(2.5,5,10,20,40μg/mL)处理后对 Hela 细胞的抑制率,并观察鸦胆子油乳处理浓度分别为10,20μg/mL 时细胞周期的变化情况。结果鸦胆子油乳处理宫颈癌 Hela 细胞后出现凋亡小体,且细胞毒作用随时间延长毒性增强;在处理48 h 后,研究组的抑制率均>60%,72 h 后抑制率均>80%;伴随鸦胆子油乳浓度的增加,G0~G1期细胞比率降低,S 期及 G2~M 期细胞比率明显增加。10μg/mL 和20μg/mL 鸦胆子油乳处理48 h 后细胞凋亡率分别为60%与70%。结论鸦胆子油乳能够明显抑制宫颈癌 Hela 细胞的增殖,且呈时间依赖性,能够诱导细胞凋亡,且使 Hela 细胞阻滞于 S 期。
关键词: 宫颈癌 Hela 细胞 鸦胆子油乳 抑制增殖 巴氏染色 细胞凋亡 -
黄芩素对宫颈癌细胞凋亡的影响
目的:观察不同浓度的黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后细胞迁移及细胞周期的变化,观察细胞培养基中具有活性的金属基质蛋白酶-2(MMP -2)、金属基质蛋白酶9(MMP -9)的变化,及 MMP -2、MMP -9、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)、细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl -2)相关 X 蛋白(Bax)、Bcl -2 mRNA 及蛋白水平表达的变化。方法体外黄芩素干预 Hela 细胞株24 h,分不含黄芩素的无血清DMEM 高糖培养基培养的细胞为空白对照组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为100μmol/L 的黄芩素为100μmol/L 组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为200μmol/L 的黄芩素为200μmol/L 组,共3组。镜下观察各组细胞形态及数量的变化、细胞迁移实验检测细胞迁移的改变、流式细胞技术法检测细胞周期发生的变化、RT -PCR 法及 Western blot 法检测 MMP -2、MMP -9、TIMP2、CyclinD1、Bax、Bcl -2 mRNA 及蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h 后,与空白对照组比较,两干预组细胞周期 G1期受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度一致(P <0.05),细胞迁移受抑制,随着黄芩素浓度逐渐增加,迁移距离逐渐减少(P <0.05),MMP -2、MMP -9活性受到抑制,抑制程度与黄芩素浓度呈正相关(P <0.05),MMP -2、MMP -9、CyclinD1、 Bcl -2的mRNA 及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势(P <0.05),TIMP2、Bax 的 mRNA 及蛋白表达趋势随黄芩素浓度增加而逐渐增强(P <0.05)。结论黄芩素干预宫颈癌 HeLa 细胞,通过阻滞细胞周期 G1期,抑制 MMP -2、MMP -9活性,上调 TIMP2、Bax 的表达,下调 MMP -2、MMP -9、CyclinD1、Bcl -2的表达,促进 HeLa细胞的凋亡。