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可溶性IL-5Rα对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响
目的 通过观察可溶性IL-5受体α(sIL-5Rα)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道炎症的影响,为哮喘疾病的治疗提供新的方法.方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常组、哮喘组及sIL-5Rα治疗组,哮喘组和sIL-5Rα治疗组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏和激发,建立哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA.sIL-5Rα治疗组每次激发前30 min腹腔注射sIL-5Rα 100 μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代.比较各组BALF细胞计数,IL-5、IL-4及嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)水平,肺组织学检查.结果 与正常对照组相比,哮喘组BALF中嗜酸粒细胞百分比增加(P＜0.05),BALF中IL-4、IL-5、Eotaxin水平增加(P＜0.05),病理示肺组织损害明显.与哮喘组相比,sIL-5Rα治疗组BALF中嗜酸粒细胞百分比降低(P＜0.05),BALF中IL-5、Eotaxin水平增加(P值均＜0.05),病理示肺组织损害明显减轻.结论 sIL-5Rα可明显减轻哮喘小鼠气道炎症.
关键词： 可溶性IL-5受体α 嗜酸粒细胞 哮喘 动物模型 -
小鼠可溶性IL-5受体α胞外区基因的克隆及原核表达
目的 克隆并原核表达小鼠可溶性IL-5受体α(sIL-5Ra)胞外区基因.方法 采用RT-PCR从BALB/c小鼠脾脏组织中分别扩增slL-5Ra胞外区前后段基因片段,酶切后将两段基因连接,插入原核表达载体pPRO EX中,构建重组表达质粒pPRO EX/slL-5Ra,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达.采用SDS-PAGE和Western blot检测目的 蛋白的表达.结果 重组表达质粒经双酶切和DNA测序,证实构建正确.表达的sIL-5Rα胞外区蛋白相对分子质量约36 100,表达量约占菌体总蛋白的30%,且可与兔抗小鼠slL-5Rα单抗发生特异性免疫反应.结论 已成功克隆并原核表达了小鼠sIL-5Rα胞外区基因,为进一步探讨sIL-5Rα对哮喘的治疗作用及开发新的哮喘治疗药物奠定了基础.
关键词： 可溶性IL-5受体α 胞外区 克隆 原核表达
