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氢气对PC12细胞缺氧复氧时内质网应激的影响
目的 探讨氧气对PC1 2细胞缺氧复氧时内质网应激的影响.方法 PC12细胞采用随机数字表法,将其随机分为4组,正常对照组:细胞常规培养25 h；阳性对照组:细胞正常培养1h后,用氧气饱和的RPM1-1640培养基继续培养24 h；缺氧复氧组:细胞缺氧1h后复氧24 h；氢气组:细胞缺氧1 h后,州氧气饱和的RPM1,1640培氧基复氧24 h.PC12细胞加入含Na2S2O4终浓度为5.0mmol/L的RPMI-1640培养液,5％ CO2培养箱37 ℃孵育1h;更换正常RPMI-1640培养液,继续培养24h,制备PC12细胞缺氧复氧模型.采用WST-1法测定细胞相对增殖率,采用硫代巴比妥酸法测定MDA浓度,采用免疫组化法检测caspase-3表达,采用RT-PCR法检测活化转录因子4(ATF4)mRNA和C/EBP同源蛋白(CHOP)mRNA的表达.结果 与正常对照组和阳性对照组比较,缺氧复氧组细胞相对增殖率降低,MDA浓度升高,caspase-3、ATF4 mRNA和CHOP mRNA的表达七调,氧气组ATF4 mRNA和CHOP mRNA的表达上调(P＜0.05)；正常对照组和阳性对照组间细胞相对增殖率、MDA浓度、caspase-3 、ATF4nRNA和CHOP mRNA的表达比较差异无统计学意义(P＞0.05)；与缺氧复氧组比较,氢气组细胞相对增殖率升高,MDA浓度降低,caspase-3、ATF4 mRNA和CHOP mRNA的表达下调(P＜0.05).结论 氧气可能通过抑制内质网应激,降低细胞凋亡,减轻PC12细胞缺氧复氧损伤.
