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miR-519家族对人牙周膜细胞内MMP-2表达的影响
目的 探讨miR-519家族对人牙周膜细胞内MMP-2表达的影响.方法 构建MMP-2双荧光素酶野生型和突变型表达载体,应用TargetScan和miRanda等软件预测作用于MMP-2 3'-UTR靶向miRNA,利用双荧光素酶报告基因检测系统验证靶向MMP-2 3'-非翻译区(3'-UTR)的miRNA.用qRT-PCR和Western blot技术检测miR-519家族对MMP-2表达的调控.结果 软件预测在MMP-2的3'-UTR位置有一个与miR-519家族的结合位点;mimics-miR-519实验组与转染control miR组和突变型载体组相比,能明显降低MMP-2载体的荧光素酶活性(P＜0.05).qRT-PCR结果显示实验组的miR-519较对照组表达显著增高(P＜0.01).qRT-PCR、Western blot结果表明miR-519抑制MMP-2mRNA和蛋白水平表达(P＜0.05).结论 miR-519家族可负性调控人牙周膜细胞内MMP-2基因的表达.
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MiR-519通过调节HuR表达抑制胃癌细胞活力
目的:探讨miR-519参与调节胃癌细胞活力的机制.方法:qPCR检测胃癌细胞中miR-519表达,Western印迹法检测胃癌细胞中HuR蛋白表达,MTT法研究肿瘤细胞的活力,脂质体转染法分别转染HuR真核表达质粒及干扰片段、转染miR-519.结果:胃癌细胞株中HuR蛋白表达高于对照组细胞,过表达HuR可增加细胞活力(P＜0.001),干扰HuR表达后,细胞活力降低(P=0.001);胃癌组织中miR-519表达低于对照组(P=0.001),过表达miR-519可抑制HuR蛋白表达并降低胃癌细胞活力.结论:MiR-519可能通过下调HuR蛋白表达而降低胃癌细胞活力.
