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侧脑室注射瘦素对大鼠迷走复合体阿黑皮素原的影响
目的 研究侧脑室注射瘦素对大鼠迷走复合体阿黑皮素原的影响,探讨瘦素是否同下丘脑弓状核一样也在迷走复合体对阿黑皮素原进行调节,从而发现瘦素在迷走复合体上发挥作用的可能路径.方法 SD大鼠36只,随机分为试验组和对照组,每组18只,试验组根据注射后处死的时间(1、3、5 h)分成3个亚组,每组6只.大鼠侧脑室留置不锈钢导管1周,自由恢复及驯养,实验动物在清醒状态下于侧脑室注射瘦素3怂.5μg/μl,对照组注射3.5μg/μl 0.9%氯化钠溶液.苏木精-伊红染色定位迷走复合体,测定阿黑皮素原在该处的表达.结果 中枢注射瘦素组大鼠侧脑室注射瘦素后1、3、5h采用免疫组化检测迷走复合体上阿黑皮素原的表达阳性细胞计数、表达阳性细胞积分光密度与生理盐水和对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),中枢注射瘦素组1、3、5 h亚组组间迷走复合体上阿黑皮素原的表达阳性细胞计数、表达阳性细胞积分光密度比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 侧脑室注射瘦素后不能引起迷走复合体上阿黑皮素原的增多.
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脑室内注射瘦素对大鼠迷走复合体瘦素受体表达的影响
目的 探讨脑室内注射瘦素后大鼠迷走复合体瘦素受体(Ob-R)表达的变化.方法 将SD大鼠24只随机分为对照组和瘦素干预1 h组(A组)、3 h组(B组)、5 h组(C组),每组6只.给药前1周行侧脑室置管,置管1周后无麻醉状态下对照组侧脑室注射生理盐水,A、B、C组侧脑室注射瘦素,剂量均为3.5 μg/μL.实验结束后取脑组织,用HE染色进行迷走复合体定位,用免疫组化方法测定Ob-R在迷走复合体的表达.结果 A、B、C组Ob-R阳性细胞数分别为(12.49±1.66)、(12.54±2.16)、(12.89±1.86)个,对照组阳性细胞数为(5.66±1.04)个;A、B、C组Ob-R阳性细胞光密度积分分别为(28.41±3.60)、(26.18±6.17)、(24.56±4.14)分,对照组为(16.02±2.06)分;与对照组比较,A、B、C组Ob-R阳性细胞数、阳性细胞光密度积分增多(P均 <0.05).A、B、C三组间Ob-R阳性细胞数、阳性细胞光密度积分比较差异无统计学意义(P均 >0.05).结论 瘦素中枢干预后可刺激迷走复合体上Ob-R的表达上调,瘦素刺激时间与Ob-R水平无关.
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大鼠结肠扩张性刺激引起内脏活动变化的实验研究
目的研究结肠扩张性牵张刺激导致的内脏活动变化的作用机制,为减少因结肠牵张性引起的并发症提供理论依据.方法采用气囊充气模拟结肠镜引起大鼠结肠扩张性牵张刺激的方法,利用电生理学方法观察大鼠支配内脏活动的神经中枢延髓内脏带(Medullary visceral zone,MVZ)中迷走复合体(vagus-solotary complex)放电频率的变化,并以胃的运动功能变化为指标,同步观察了大鼠胃电变化情况.应用免疫荧光技术,以原癌基因c-fos为标志,观察MVZ中迷走复合体的神经元被激活情况.结果给予气囊充气达0.8 ml时,迷走复合体中神经元放电频率、Fos的表达以及胃电没有明显改变.给予气囊充气达1.0 ml时,迷走复合体中神经元放电、Fos的表达以及胃电开始增加.当气囊充气达1.2 ml时,迷走复合体中神经元放电、Fos的表达以及胃电开始有明显增加的改变.气囊充气达1.4 ml时,迷走复合体中神经元放电、Fos的表达以及胃电的改变为明显,而当气囊注入空气1.5 ml时,迷走复合体中神经元放电、Fos的表达以及胃电的变化与气囊充气1.4 ml时相比,差异不是很明显.结论结肠扩张性刺激可以对支配内脏活动的延髓内脏带中的神经元有明显的激活作用,进而导致内脏活动的相应变化.
