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  • Smad6信号干扰对MSCs骨向分化中Smad5及Smurf1基因表达的影响

    作者:刘猛;董伟;冯晓洁;邓久鹏;戚孟春;李金源

    目的 研究在骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)骨向分化中Smad6信号干扰对Smad5、Smurf1基因表达的影响.方法 培养小鼠骨髓MSCs,并分为3组:A组为对照细胞;B组细胞用携带绿色荧光蛋白(GFP)的空白载体病毒转染+BMP-2骨向诱导;C组细胞用Smad6重组RNA干扰载体转染+BMP-2诱导.结果 病毒转染后GFP在MSCs中有效表达,病毒转染效率接近100%.与A组比较,BMP-2诱导24 h显著提高了B组Smurf1 mRNA 水平 (P<0.01);而Smad6信号干扰在两个时间点则进一步提高了C组Smurf1 mRNA水平,并显著高于B组(P<0.01).C组磷酸化的Smad5(pSmad5)和 Smurf1水平在两个时间点也显著高于B组(P<0.01),而Smad5蛋白水平则未受影响.结论 在BMP-2 诱导的MSCs骨向分化中,Smad6 RNA 干扰可促进Smad5磷酸化,并引起Smurf1基因表达代偿性增高.

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